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抗氧化酶酶液提取 取0.5 g鲜样，加入2mL预冷的50 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.8），在预冷的研钵中磨成匀浆，加入3mL冲洗研钵两次，致使最终体积为8mL； 于4?C下12,000 g离心15 min，上清液用于SODPODAPXCATGR酶活性和MDA含量的测定。 超氧化物歧化酶（SOD）（560nm） 【试剂】 NBT反应液：250mL磷酸钾缓冲液（50 mM，pH7.8）内含： +0.4849g甲硫氨酸（13 mM，待完全溶解后再溶其他物质） +0.01533gNBT（75 ?M） +0.0073gEDTA （0.1 mM ） +0.000188g核黄素（2 ?M，测定前加入并进行试验） 【方法步骤】NBT法（氮蓝四唑光氧化还原法） 1. 2.9mLNBT反应液+100uL酶粗提液，两管对照（光照/黑暗），用0.1mL双蒸水替代酶提取液 2. 暗中对照管做空白调零，反应混合液在4000 1x条件下反应20 min以抑制NBT光化还原的50％为1个酶活性单位计算SOD活性。 3. 波长560nm处测定光对照管、测定管吸光值，根据以下公式测定SOD活性。 4. (A0-AS)*Vt*60 计算 A0*0.5*FW*Vs*t SOD活性（U.g-1FW.h-1）= 式中，A0：光下对照管吸光度；As:样品测定管吸光度；Vt:样品提取液总体积（mL）;Vs:测定时取粗酶液量（mL）; t: 显色反应光照时间（min）；FW：样品鲜重（g）。 @starseacow 发自小木虫IOS客户端 |
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