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innocent.

新虫 (初入文坛)

[交流] 无缝克隆遇到的奇奇怪怪 已有1人参与

最近构建载体,想速度快一点就没用T4,直接用无缝克隆但一直失败(用的诺唯赞试剂盒),酶切后无缝连接转DH5a挑单菌落PCR,用目的片段引物P就有条带且条带长度正确,但用载体引物就一直p不出来,换了载体引物也不行,又提质粒酶切后发现长度与空载体长度一致,是不是说明没连上,那为什么拿目的片段引物能p出来呢?实在疑惑,已经重复做好几次了都是这样,三个基因都是这个问题,大家有出现过这样的情况吗?
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金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
那就是没连上呗,菌落pcr有假阳性,只能这么理解
2楼2024-10-19 13:47:32
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