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heqin-1985

银虫 (小有名气)

[交流] 请教:请问摇瓶发酵培养基里的沉淀怎么除去啊?

配的摇瓶发酵培养基,杀菌前还比较澄清,杀菌后就出现好多沉淀,请问是怎么回事?还有怎么才可以避免啊?杀菌后量大过滤不怎么方便,不知道怎么办。请教一下大家。O(∩_∩)O谢谢!

PS:培养了24小时的菌体,放置两天出现沉淀分层现象,以前没有过,这是不是说菌体长的不好啊?
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njxmhl

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
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1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢解答 10-27 13:51
估计是培养基中某些物质在高温条件下发生了化学沉淀反应,应针对配方分析产生沉淀的原因。为避免出现这种情况,建议将某些成分单独灭菌后,然后再混合。
2楼2009-10-27 11:53:44
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nn0808

银虫 (小有名气)

★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢交流 10-27 13:51
都不知道你的培养基是些什么成分,难解决啊.先看看培养基是些什么成分吧,还有你培养的细菌是什么呢?放线菌?大肠杆菌.说清楚点吗!不说清楚谁能知道呢
3楼2009-10-27 13:48:32
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heqin-1985

银虫 (小有名气)

摇瓶种子培养液(g/L):
甘油 30、NH4Cl 2.0、酵母膏 3.0、KH2PO4 3.4、MgSO4•7H2O 0.2、CaCl2 0.1、柠檬酸0.42g/L、微量元素溶液2mL/L。
是克雷伯杆菌。
微量元素溶液:有CuCl2、H3BO3、MnCl2、Na2MoO4、NiCl2、ZnSO4
引用回帖:
Originally posted by nn0808 at 2009-10-27 13:48:
都不知道你的培养基是些什么成分,难解决啊.先看看培养基是些什么成分吧,还有你培养的细菌是什么呢?放线菌?大肠杆菌.说清楚点吗!不说清楚谁能知道呢

4楼2009-10-27 22:49:06
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by heqin-1985 at 2009-10-27 22:49:
摇瓶种子培养液(g/L):
甘油 30、NH4Cl 2.0、酵母膏 3.0、KH2PO4 3.4、MgSO4•7H2O 0.2、CaCl2 0.1、柠檬酸0.42g/L、微量元素溶液2mL/L。
是克雷伯杆菌。
微量元素溶液:有CuCl2、H3BO3、MnCl2、Na2MoO ...

主要是培养基中的Ca Mg 和磷酸盐产生的沉淀,
另外,自来水中也有大量的Mg、Ca离子等,
这是由于你培养基组份决定的,你的培养基沉淀很难避免啊。
解决办法:
(1)Mg Ca盐类 配制母液,然后单独灭菌,单独添加!
(2)使用去离子水配制培养基,可以部分减少沉淀。

[ Last edited by HarveyWang on 2009-10-29 at 10:55 ]
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2009-10-29 10:53:48
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

引用回帖:
Originally posted by heqin-1985 at 2009-10-27 10:28:
配的摇瓶发酵培养基,杀菌前还比较澄清,杀菌后就出现好多沉淀,请问是怎么回事?还有怎么才可以避免啊?杀菌后量大过滤不怎么方便,不知道怎么办。请教一下大家。O(∩_∩)O谢谢!

PS:培养了24小时的菌体,放 ...

菌体沉淀分层主要原因是:培养基中离子很多,可以使菌体聚集!
不信,你去掉所有盐类,只用碳氮源配,然后培养菌体做对照。
这好像没什么副作用的啊。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
6楼2009-10-29 10:58:19
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heqin-1985

银虫 (小有名气)

分析挺透彻的,谢谢呀~~
引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2009-10-29 10:53:


主要是培养基中的Ca Mg 和磷酸盐产生的沉淀,
另外,自来水中也有大量的Mg、Ca离子等,
这是由于你培养基组份决定的,你的培养基沉淀很难避免啊。
解决办法:
(1)Mg Ca盐类 配制母液,然后单独灭菌,单 ...

7楼2009-10-29 14:26:50
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