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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教：请问摇瓶发酵培养基里的沉淀怎么除去啊？
汕头大学海洋科学接受调剂
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heqin-1985

银虫 (小有名气)

[交流] 请教：请问摇瓶发酵培养基里的沉淀怎么除去啊？

配的摇瓶发酵培养基，杀菌前还比较澄清，杀菌后就出现好多沉淀，请问是怎么回事？还有怎么才可以避免啊？杀菌后量大过滤不怎么方便，不知道怎么办。请教一下大家。O(∩_∩)O谢谢！

PS：培养了24小时的菌体，放置两天出现沉淀分层现象，以前没有过，这是不是说菌体长的不好啊？
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1楼 2009-10-27 10:28:06
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njxmhl

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢解答 10-27 13:51
估计是培养基中某些物质在高温条件下发生了化学沉淀反应，应针对配方分析产生沉淀的原因。为避免出现这种情况，建议将某些成分单独灭菌后，然后再混合。
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2楼2009-10-27 11:53:44
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nn0808

银虫 (小有名气)
★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢交流 10-27 13:51
都不知道你的培养基是些什么成分,难解决啊.先看看培养基是些什么成分吧,还有你培养的细菌是什么呢?放线菌?大肠杆菌.说清楚点吗!不说清楚谁能知道呢
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3楼2009-10-27 13:48:32
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heqin-1985

银虫 (小有名气)
摇瓶种子培养液（g/L）：
甘油 30、NH4Cl 2.0、酵母膏 3.0、KH2PO4 3.4、MgSO4•7H2O 0.2、CaCl2 0.1、柠檬酸0.42g/L、微量元素溶液2mL/L。
是克雷伯杆菌。
微量元素溶液：有CuCl2、H3BO3、MnCl2、Na2MoO4、NiCl2、ZnSO4
引用回帖:
Originally posted by nn0808 at 2009-10-27 13:48:
都不知道你的培养基是些什么成分,难解决啊.先看看培养基是些什么成分吧,还有你培养的细菌是什么呢?放线菌?大肠杆菌.说清楚点吗!不说清楚谁能知道呢

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4楼2009-10-27 22:49:06
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by heqin-1985 at 2009-10-27 22:49:
摇瓶种子培养液（g/L）：
甘油 30、NH4Cl 2.0、酵母膏 3.0、KH2PO4 3.4、MgSO4•7H2O 0.2、CaCl2 0.1、柠檬酸0.42g/L、微量元素溶液2mL/L。
是克雷伯杆菌。
微量元素溶液：有CuCl2、H3BO3、MnCl2、Na2MoO ...

主要是培养基中的Ca Mg 和磷酸盐产生的沉淀，
另外，自来水中也有大量的Mg、Ca离子等，
这是由于你培养基组份决定的，你的培养基沉淀很难避免啊。
解决办法：
（1）Mg Ca盐类 配制母液，然后单独灭菌，单独添加！
（2）使用去离子水配制培养基，可以部分减少沉淀。

[ Last edited by HarveyWang on 2009-10-29 at 10:55 ]
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2009-10-29 10:53:48
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
引用回帖:
Originally posted by heqin-1985 at 2009-10-27 10:28:
配的摇瓶发酵培养基，杀菌前还比较澄清，杀菌后就出现好多沉淀，请问是怎么回事？还有怎么才可以避免啊？杀菌后量大过滤不怎么方便，不知道怎么办。请教一下大家。O(∩_∩)O谢谢！

PS：培养了24小时的菌体，放 ...

菌体沉淀分层主要原因是：培养基中离子很多，可以使菌体聚集！
不信，你去掉所有盐类，只用碳氮源配，然后培养菌体做对照。
这好像没什么副作用的啊。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
6楼2009-10-29 10:58:19
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heqin-1985

银虫 (小有名气)
分析挺透彻的，谢谢呀~~
引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2009-10-29 10:53:


主要是培养基中的Ca Mg 和磷酸盐产生的沉淀，
另外，自来水中也有大量的Mg、Ca离子等，
这是由于你培养基组份决定的，你的培养基沉淀很难避免啊。
解决办法：
（1）Mg Ca盐类 配制母液，然后单独灭菌，单 ...

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7楼2009-10-29 14:26:50
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