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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 怎么看PET28载体酶切后的片段？
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yoyoyehan

[交流] 怎么看PET28载体酶切后的片段？

用xbaI和xhoI酶 双酶切PET28载体，电泳条带2个，我该回收哪个？
双酶切后 载体的片段应该是多少呀？怎么判断的呀？谢谢！
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1楼 2009-10-26 22:50:26
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
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空p28，5369bp，酶切后5Kb+的样子，根据maker找到你需要的片段。如果是空载的话，有两条带应该部分p28没切开。
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Thank-you，so-blue.
3楼2009-10-27 08:44:37
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by yoyoyehan at 2009-10-26 22:50:
用xbaI和xhoI酶 双酶切PET28载体，电泳条带2个，我该回收哪个？
双酶切后 载体的片段应该是多少呀？怎么判断的呀？谢谢！

你切的PET28是空载体吗?连过东西吗？如果你要构建克隆的话肯定是要回收大条带啊，xbaI和xhoI在多克隆位点那里，所以中间的是小片段。
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2楼2009-10-27 00:04:08
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bioxixi

木虫 (著名写手)
需要那个片段就回收那个喽
双酶切后得到线性片段，大小就是载体总长减去两个酶切位点之间片段，你有质粒图谱吧，一看就知道多大了，大约五千多的样子吧
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4楼2009-10-27 09:11:31
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zier1011

木虫 (著名写手)
★
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楼主你没有质粒的图谱吗？你的酶切位点在哪里，质粒有多大，你计算下不就知道了
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花还香香的
5楼2009-10-27 10:01:32
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