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yoyoyehan

[交流] 怎么看PET28载体酶切后的片段?

用xbaI和xhoI酶 双酶切PET28载体,电泳条带2个,我该回收哪个?
双酶切后 载体的片段应该是多少呀?怎么判断的呀?谢谢!
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


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引用回帖:
Originally posted by yoyoyehan at 2009-10-26 22:50:
用xbaI和xhoI酶 双酶切PET28载体,电泳条带2个,我该回收哪个?
双酶切后 载体的片段应该是多少呀?怎么判断的呀?谢谢!

你切的PET28是空载体吗?连过东西吗?如果你要构建克隆的话肯定是要回收大条带啊,xbaI和xhoI在多克隆位点那里,所以中间的是小片段。
2楼2009-10-27 00:04:08
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


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空p28,5369bp,酶切后5Kb+的样子,根据maker找到你需要的片段。如果是空载的话,有两条带应该部分p28没切开。
Thank-you,so-blue.
3楼2009-10-27 08:44:37
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bioxixi

木虫 (著名写手)

需要那个片段就回收那个喽
双酶切后得到线性片段,大小就是载体总长减去两个酶切位点之间片段,你有质粒图谱吧,一看就知道多大了,大约五千多的样子吧
4楼2009-10-27 09:11:31
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zier1011

木虫 (著名写手)


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楼主你没有质粒的图谱吗?你的酶切位点在哪里,质粒有多大,你计算下不就知道了
花还香香的
5楼2009-10-27 10:01:32
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