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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助！PCR检测大肠杆菌临床株某一300bp左右基因片段，产物条带大小一直错误
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Guokuro

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助！PCR检测大肠杆菌临床株某一300bp左右基因片段，产物条带大小一直错误

用的是takara高保酶，10微升体系，程序94 5m；94 30s；55 30s；72 15s；72 7m；16 ∞，30个循环。
目的条带是310bp，模板是直接沾取单克隆用ddH2O稀释制备而得。上下游引物各长19bp是直接从参考文献引用的，并且在ncbi上blast的结果显示特异性高，不知道为什么总是会跑出杂带
marker大小：5000、3000、2000、1500、1000、750、500、250
除maeker外其余泳道均为不同的大肠杆菌临床分离株

file:///C:/Users/%E5%BC%A0%E5%B0%8F%E9%BB%92/Desktop/%E5%9B%BE%E7%89%871.png
file:///C:/Users/%E5%BC%A0%E5%B0%8F%E9%BB%92/Desktop/%E5%9B%BE%E7%89%872.png
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1楼 2024-07-11 11:07:13
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壶壶亚亚la

铁虫 (初入文坛)
看不到图片
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2楼2024-07-13 20:05:28
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Guokuro

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 壶壶亚亚la at 2024-07-13 20:05:28
看不到图片

file:///C:/Users/%E5%BC%A0%E5%B0%8F%E9%BB%92/Desktop/%E5%9B%BE%E7%89%871.png
file:///C:/Users/%E5%BC%A0%E5%B0%8F%E9%BB%92/Desktop/%E5%9B%BE%E7%89%872.png
两张图片的网址，刚刚看了一下，复制粘贴到网址栏是可以看到的
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3楼2024-07-14 17:38:14
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