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求助!PCR检测大肠杆菌临床株某一300bp左右基因片段,产物条带大小一直错误
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用的是takara高保酶,10微升体系,程序94 5m;94 30s;55 30s;72 15s;72 7m;16 ∞,30个循环。 目的条带是310bp,模板是直接沾取单克隆用ddH2O稀释制备而得。上下游引物各长19bp是直接从参考文献引用的,并且在ncbi上blast的结果显示特异性高,不知道为什么总是会跑出杂带 marker大小:5000、3000、2000、1500、1000、750、500、250 除maeker外其余泳道均为不同的大肠杆菌临床分离株 file:///C:/Users/%E5%BC%A0%E5%B0%8F%E9%BB%92/Desktop/%E5%9B%BE%E7%89%871.png file:///C:/Users/%E5%BC%A0%E5%B0%8F%E9%BB%92/Desktop/%E5%9B%BE%E7%89%872.png |
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