| 查看: 47 | 回复: 0 | |||
Sh毕合生物
|
[交流]
抗体的制备有哪些
|
|
（1）多克隆抗体的制备。 ①免疫方法：对多克隆抗体，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。一般来说，皮下或肌肉免疫法产生的抗体比较多；皮内免疫法所需的抗原量少，在抗原宝贵时特别适用，但与之相对的，它产生的抗体量也不多。混合免疫法的优点是抗原用量小，产生抗体速度快。 ②多克隆抗体的制备：将抗原免疫动物（常用的动物为兔、羊、狗等），分离出抗血清并纯化抗体。多克隆抗体的均一性较差，其特异性相对较低，因此，多克隆抗体在农药残留速测技术中的应用受到一定的限制。但近年来有学者恰恰利用了多抗的交叉反应高的特点，通过制备出具有某类（或某几种）农药的“共性结构”的半抗原或者通过制备出含多个抗原决定簇的人工抗原来制备“宽谱特异性”抗体，进行农药多残留分析研究。 （2）单克隆抗体的制备。单克隆抗体制备技术最初是由K鰄ler和Milstein（1975）利用B淋巴细胞杂交瘤技术创立的。目前该技术已广泛应用于疾病诊断及生物、医学研究、环境和食品安全检测（监测）等方面。单抗均一性高，只和抗原某一决定簇结合，有更高的特异性，而且，产生抗体的单克隆细胞可在体外传代繁殖，不受动物免疫时间限制生产抗体。只要管理和培养技术正确，抗体就可无限量的产生。基本过程是动物免疫、细胞融合、克隆筛选、单克隆抗体性质鉴定、腹水诱发、收集和纯化等。 （3）重组抗体的制备。近年来，随着蛋白质技术及DNA重组技术的发展，人们通过对抗体产生的基因本质、基因重组抗体筛选技术和直接定位诱导基因操纵技术的研究，获得用于指定空间位置并具有各种特异性、亲和性，能忍受一定温度、pH和有机溶剂的人工重组抗体。一般是将抗原免疫小鼠，一定时间后无菌条件下取出小鼠脾脏，提取脾细胞总RNA，以RNA逆转录合成的cDNA为模板，PCR扩增抗体，将抗体中的轻链、重链连接成ScFv（single-chainvariablefragment）。酶切经PCR扩增的ScFv片段，并与噬菌体载体连接，然后以常规方法转化入大肠杆菌或其他生物体中。人工培养带有噬菌体抗体的大肠杆菌，即得到重组抗体。该方法生产抗体速度快，可通过诱变改变抗体特性，使抗体的特异性更强，而且，利用这项技术获得的噬菌体抗体库，能同时识别多种农药，可用于农药多残留免疫速测技术的研究。 毕合生物(www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
回复此楼» 猜你喜欢
30岁 想读非全博，求建议
已经有13人回复
-
我在写关于多维空间的论文，希望能与大家交流，准备在science上发表
已经有14人回复
-
青拔答辩通知出来了
已经有3人回复
-
2024年度国家资助博士后研究人员计划（B、C 档）也不知道什么时候出
已经有15人回复
-
博后BC就没人问么？存在感好低啊！
已经有5人回复
-
出结果了
已经有31人回复
-
2024上会名单已出
已经有7人回复
-
科研之友最近访客那出现来自北京的未知用户，什么情况？
已经有7人回复
-
博后面上基金和特助能否同一次中标
已经有3人回复
-
offer选择
已经有13人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
5