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DSS诱导肠炎造模的方法及注意事项 已有1人参与
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炎症性肠病（IBD）是一种非特异性、慢性、复发性胃肠道的炎性病症，主要包括溃疡性结肠炎（UC）和克罗恩病（CD）。病患会出现强烈的腹痛、腹泻和直肠便血，黏液血便和里急后重等，其发病率呈逐年増长趋势，并且在任何年龄段皆可发生，被世界卫生组织列为现代难治病之一。炎症性肠病的病变部位位于回肠末端和结直肠，主要表现在粘膜和粘膜下层的连续性炎症。 DSS是一种由蔗糖合成的硫酸多糖体, 并具有抗凝作用的白色或灰白色粉末,当DSS施用于小鼠时，它会破坏上皮细胞，非特异性免疫细胞会释放细胞因子，导致结肠发炎，其特征在于溃疡和粒细胞浸润。 常用的造模分子量为36000-50000Da。有以下特点： 1.高纯度及高稳定性2.高含硫量：19%，<0.2%游离硫酸盐3.高手性：+104˚比旋光度4.低pH值：6.2（1%水溶液） DSS诱导急性肠炎 1）每笼饲养的小鼠最多不要超过5只。 2）小鼠标记并称取基准体重。 3）配制3-5%（w/v）的DSS水溶液，在实验组动物中取代正常饮用水。根据不同实验室的饲养条件以及不同的动物品系等可选择最佳饮用浓度。 4）每天观察动物的一般情况，饮水量，体重，大便性状，以及是否有便血。计算动物每天的体重降低百分比，公式如下： [(体重—基准体重)/基准体重] X 100 5）喂食第7天时，处死动物，解剖取肠道组织，并做病理切片，HE染色。 DSS诱导慢性肠炎 1）每笼饲养的小鼠最多不要超过5只。 2）小鼠标记并称取基准体重。 3）配制2-3%（w/v）的DSS水溶液，在实验组动物中取代正常饮用水。根据不同实验室的饲养条件以及不同的动物品系等可选择最佳饮用浓度。 4）每天观察动物的一般情况，饮水量，体重，大便性状，以及是否有便血。计算动物每天的体重降低百分比，公式如下： [(体重—基准体重)/基准体重] X 100 5）喂食5-7d后，用正常饮用水代替DSS水溶液饮用7-14d。此为一个循环周期，通常进行3-5个循环。 6）在最后一个循环周期的最后一天，处死动物，解剖取肠道组织，并做病理切片，HE染色。 喂食注意事项 1)DSS用无菌水配制，并用滤膜过滤，现用现配。 2)建议每1-2天更换DSS水溶液。 3)每笼饲养动物不要过多，建议2-3只，最好不要超过5只。 4)选取相同饲养条件下的动物。 5)不要经常更换饲养笼。 6)检查水瓶是否漏水。 |
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