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蛋白激酶胞内结构域原核表达纯化 蛋白质出现在菌体沉淀中该怎么纯化 已有1人参与
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蛋白原核表达不出来，有没有什么办法？ 本人最近在做磷酸化实验，目前在纯化一个激酶，将kinase domain（跨膜结构域已去除）的序列构建到GST载体中，200ml培养基的菌体用50ml裂解液重悬破碎后离心，拷染发现蛋白质仅在菌体破碎后的沉淀中检测到，在上清中检测不到，用的是rosetta菌株，有没有大神指导一下这种情况该怎么纯化，非常感谢！ 之前也用过pET-28a载体纯化，也是同样的情况。 |
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