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wordsworth3180

木虫 (正式写手)

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[交流] SDS_PAGE跑胶无条带

最近跑蛋白电泳总是不顺利，开始的时候样品加不进去总是飘，
好不容易加进去了，跑了半天居然除了marker都没有条带。明明看到溴酚蓝移动呢。
而且是破碎的菌体蛋白，肯定应该有条带啊！
唉恳请各位虫友前辈帮忙给分析分析，如何解决！
谢谢各位了！

[ Last edited by 1949stone on 2009-10-24 at 11:06 ]

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1楼 2009-10-24 10:36:57

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黑罕

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1949stone(金币+1,VIP+0):不错不错 10-24 11:05

首先到隔壁组去跑样
看是否是样品的处理的问题
然后就要考虑试剂的问题
一个个的排除找问题

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2楼2009-10-24 11:04:44

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missu

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你的样品是怎么处理的啊？配制的Loading Buffer确定没有问题吗？样品和Loading Buffer要充分混匀，一般不会加不进去或是飘出来的。另一方面，你说除Marker以外都没有条带，那么你有没有在上样前定过总蛋白的浓度呢？毕竟SDS-PAGE的检测范围是有限的。如果你破碎菌体时使用的Buffer太多这样会造成蛋白质的稀释，自然就跑不出条带了。原因有很多种，还是要自己逐一分析了。

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3楼2009-10-24 13:00:04

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