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血小板乳酸脱氢酶(LDH)检测操作细节
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目前这个实验参考的是以下步骤 ①标准曲线液配制：在离心管中加入 100μPRP和900μIPBS，进行二次离心，在3500rpm转速下处理5min，除去上清液后，在剩余的血浆中加入50μl的1% Triton X-100，反应 5min，取出100μl,加入96孔培养板第1孔，令该孔浓度为100%，依次进行稀释，使第2-8孔的浓度分别呈现为 50%、25%、12.5%、6.25%、3.125%、1.5625%、0梯度浓度。 ②将裁剪好的对比样品放入孔板中，各样品表面加入50μL人富血小板血浆，并在表面充分铺展，在37℃恒温水浴中培养45min后，用PBS清洗3次每次3分钟，清洗后用滤纸将样品背面波体吸干，移入新的 孔板中 ③在各样品表面加入 40μl/孔的 Triton 液，反应 5min ④向96 孔培养板新孔(包括八个标准曲线孔和样品孔)分别加入200μl显色Reagent液，快速取配制好的标准曲线液及样品表面液体 25ul,依次加入96 孔板中的 Reagent 液中;在酶标仪340nm处中读取吸光度值 有几个问题： 1.步骤1中，为什么加入pbs进行二次离心，二次离心之后除去上清液是要去除pbs？看见有的文献里是去除一半上清液是为什么？ 2.根据以上步骤，测出来的是血小板的相对浓度，某一个数值不能单独来表征什么是吗 |
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