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科研狗的日常吖

新虫 (初入文坛)

[交流] 微生物学常用培养基配方大全

1.牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)

牛肉膏3g/L,蛋白胨5g/L,NaC1 10 g/L,琼脂1.5~2.0 g/L,pH 7.0~7.2。121℃灭菌20 min。JSENB品牌微生物培养原料一站供应。

2.高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)

可溶性淀粉20 g/L,KNO3 1 g/L,NaCl 0.5 g/L, K2HPO4 0.5 g/L,MgSO4 0.5 g/L, FeSO4 0.01 g/L,琼脂 20 g/L,pH 7.2~7.4。

配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000 ml。121℃灭菌20 min。

3. 查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)

NaNO3 2 g/L, K2HPO4 1 g/L,KC1 0.5 g/L,MgSO4 0.5 g/L,FeSO4 0.01 g/L,蔗糖30 g/L,琼脂15~20 g/L,pH自然。121℃灭菌20 min。

4.马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)

葡萄糖10 g,蛋白胨5 g,K2HPO4 1 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100 ml,琼脂15~20 g,蒸馏水800 ml,115℃灭菌 30 min。

临用前加入过滤除菌的0.03%链霉素稀释液100 ml,使链霉素的终浓度为30 μg/ml。

5.马铃薯培养基(简称 PDA)(培养真菌用)

马铃薯200 g/L,蔗糖(或葡萄糖)20 g/L,琼脂15~20 g/L,pH自然。121℃灭菌30min(若为葡萄糖则在115℃灭菌30 min)。

马铃薯去皮,切成块煮沸30 min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000 ml。

6.麦芽汁琼脂培养基(培养真菌用)

1)取大麦或小麦若干,洗净后浸泡6~12 h,置15℃阴暗处,上面盖纱布一块,每日早、中、晚各淋水一次,待其发芽,麦根伸长至麦粒的两倍时,停止发芽,摊开晒干或烘干备用。

2)将干麦芽磨碎,1份麦芽加4份水,置65℃水浴中糖化3~4 h,可用碘滴定糖化程度。加水约20 ml调匀,至产生泡沫,然后倒在糖化液中搅拌煮沸。

3)煮沸后的糖化液用4~6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用蛋白澄清,即将一个鸡蛋白加水约20 ml,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

4)将滤液稀释到5~6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。121℃灭菌30 min。
7.无氮培养基(培养自生固氮菌、钾细菌等)

甘露醇(或葡萄糖)10 g/L,K2HPO4 0.2 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,NaC1 0.2 g/L,CaSO4·2H2O 0.2 g/L,CaCO₃ 5 g/L,pH 7.0~7.2。115℃灭菌30 min。

8.半固体肉膏蛋白胨培养基

肉膏蛋白胨液体培养基100 ml,琼脂0.35~0.4 g,pH 7.6,121℃灭菌20min。

9.合成培养基

偏磷酸铵1 g/L,KCl 0.2 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,豆芽汁10 ml,琼脂20 g/L。pH 7.0。

加12 ml 0.04%的溴钾酚紫(pH 5.2~6.8,颜色由黄变紫,作指示剂)。121℃灭菌 20 min。

10.豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基

黄豆芽100 g/L,蔗糖(或葡萄糖)50 g/L,pH自然。

称新鲜豆芽100 g放入烧杯中,加水1000 ml,煮沸约30 min,用纱布过滤。加水补足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50 g,煮沸熔化。121℃灭菌20 min或115℃灭菌30 min。

11.油脂培养基

蛋白胨10 g/L,牛肉膏5 g/L,NaCl 5 g/L,香油或花生油10 g/L,1.6%中性红水溶液1 ml,琼脂15~20 g/L,pH 7.2。121℃灭菌 20 min。

配制时,调好pH后,再加入中性红,分装时,需不断搅拌,使油滴均匀分布于培养基中。

12.淀粉培养基

蛋白胨10 g/L,牛肉膏5 g/L,NaC1 5 g/L,可溶性淀粉2 g/L,琼脂15~20 g/L。JSENB品牌微生物培养原料一站供应,溶解淀粉时可参照高氏1号培养基的配制方法。

13.明胶培养基

牛肉膏蛋白胨液100 ml,明胶12~18 g。

在水浴锅中将上述成分熔化,不断搅拌。溶化后调pH 7.2~7.4。121℃灭菌30 min。

14.蛋白胨水培养基(用于吲哚试验)

蛋白胨10 g/L,NaCl 5 g/L,pH 7.6。121℃灭菌 20 min。

15.糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验)

蛋白胨水培养基1000 ml,1.6%溴钾酚紫乙醇溶液1~2 ml,pH 7.6。

另配制20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10 ml。

1)将上述含指示剂的蛋白胨水培养基(pH 7.6)分装于试管中,在每管内放一倒置的小玻璃管,使其充满培养液。

2)将已分装好的蛋白胨水和20%的各种糖溶液分别灭菌,蛋白胨水于121℃灭菌20 min,糖溶液则于115℃灭菌30 min。

3)灭菌后,以无菌操作将浓度为20%的无菌糖溶液加入蛋白胨水中(按每10 ml培养基中加入20%的糖液0.5 ml,使其终浓度为1%)。
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