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【求助】盐酸克伦特罗抗原合成失败
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参考了不少文献，我合成盐酸克伦特罗抗原过程如下： 3mg盐酸克伦特罗标准品溶解到1ml 1M HCl 和0.5ml水，4摄氏度下分三次加0.06ml NaNO2，并遮光搅拌1小时，然后加入氨基磺酸氨终止。 将上述溶液缓慢滴加到1ml的OVA溶液中（含OVA 20mg），4摄氏度搅拌的同时调节pH在9左右，搅拌1h，然后冰箱过夜。 再就是用PBS透析了。 最后用这个作为包被原进行ELISA，完全没有显色反应。 抗体确定无误，酶标抗体与底物显色反应良好。 标准品也没有问题。 请教一下，是不是不能直接用标准品制备抗原？还是我的实验过程有问题呢？ |
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