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[交流]
做药代用HPLC测血药浓度时配制对照品溶液时遇到的问题。
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| 我做药代用HPLC测定血药浓度时，配制对照品是先用甲醇溶解标准品配成一定浓度的母液备用，做标准曲线时精密吸取一定量的母液加入血浆中配制不同浓度的对照品溶液，这时候加的血浆是直接加入抗凝剂后离心所得的血浆吗？如果是这样的话，加入母液是会不会使血浆中的蛋白质变性产生沉淀？即使没沉淀，这样的对照品进样时会不会产生很多蛋白质类的杂峰？请指教！ |
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2楼2009-10-20 23:50:44
3楼2009-10-21 17:09:41
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xiongzai08(金币+2,VIP+0): 10-24 11:11
ynmyx(金币+1,VIP+0):谢谢您的热心解答！！ 11-2 13:40
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ynmyx(金币+1,VIP+0):谢谢您的热心解答！！ 11-2 13:40
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问题1：这时候加的血浆是直接加入抗凝剂后离心所得的血浆吗？ 回答：是的。 问题2：如果是这样的话，加入母液是会不会使血浆中的蛋白质变性产生沉淀？ 回答：会产生少量的蛋白质变性沉淀，因为甲醇会使蛋白质变性。 问题3：即使没沉淀，这样的对照品进样时会不会产生很多蛋白质类的杂峰？ 看到你的这个问题，我断定你是个刚开始做这方面的新手。生物样品、特别是血样，用色谱仪器检测怎么可能没有杂峰呢？只要这些杂峰不干扰你的样品峰就可以了。 做实验之前要多查相关的资料，把基础性的问题搞清后再做，要不然要走好多弯路的。 本人也做过一些药代动力学的工作，有一些经验，如还有相关的问题，也乐意一起讨论，互相交流嘛 |
4楼2009-10-22 09:49:35
5楼2009-10-22 15:55:20
剪纸艺术
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6楼2009-10-22 16:08:13
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7楼2009-10-22 16:48:16
8楼2009-10-24 17:02:40
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xiongzai08(金币+1,VIP+0): 10-28 08:52
ynmyx(金币+1,VIP+0):谢谢您的热心解答！！ 11-2 13:40
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1.母液不一定非要用100%的甲醇配置，50%的若能做到就可以，还有利于长期储存。 2.配置含基质的标曲溶液有很多种方法，比如先配好一系列的纯粹溶液样品，再spike到血浆中去，这个比例一般是1：20，比如取20ul标准溶液，加入到380ul的血浆中去，加完之后马上震荡，一点点沉淀是没有关系的。 3.一般我们购买的空白血浆肯定是用过抗凝剂的，比如K2EDTA或者heparin等，你做实际样品的时候要选择同样的抗凝剂的。 若需要做HPLC-MS-MS的样品，可以与 lcmsms@163.com联系，偶可以非常优惠的帮忙的！ |
9楼2009-10-27 11:18:54
10楼2009-11-02 13:00:27