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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR结果麻烦大家帮忙分析一下
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sulining

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR结果麻烦大家帮忙分析一下

原来做预实验时DNA都可以扩增出来，现在只是个别能扩增出来，不知道是这么原因啊，DNA的质量很好，麻烦大家分析一下。有的扩增的还很淡

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-31 at 22:56 ]
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1楼 2009-10-19 10:44:59
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zhaohui-eric

木虫 (著名写手)

提高循环数，换新Taq酶试一试

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
提高循环数，换新Taq酶试一试
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2楼2009-10-19 11:03:35
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川
★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0): 10-19 12:50
循环数提高效果不一定好吧
建议回顾一下 看看某些试剂或操作是否有问题
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海纳百川止于至善
3楼2009-10-19 12:46:40
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bioxixi

木虫 (著名写手)
★
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常事
建议体系不要一次混太多，几个一组就好了
再就是操作仔细点儿  
再就是要保证耗材、仪器都没有问题
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4楼2009-10-19 13:38:24
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小小豆豆

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
对前后的体系进行对比，看看哪些环节有差别，应该就是那个环节的问题
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5楼2009-10-19 14:29:24
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也遇到这样的问题，体系是先mix后分装P的，有几管没P出来，怀疑是样品台有的孔出了问题。
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Thank-you，so-blue.
6楼2009-10-19 16:59:39
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yxx41

金虫 (小有名气)
我一直都是这个问题啊，没办法，拖了很久，最后就出来一个算一个，做的是土壤的DNA，用的是手提法，因为老板不会同意我买2500的Qiagen的试剂盒的……
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内事不决问百度，外事不决问Google，横批：wikipedia
7楼2009-10-19 22:14:54
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Entrez1110

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
混合再分管，有时会出现这种情况！
为了解决这个问题，我是一管管加组分。
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8楼2009-10-19 22:20:21
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qqsvery

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
首先，marker很亮，所以不是EB的问题，
然后，只有个别有条带，说明你点样的时候应该都加进去了
其次，有带的样不是很亮，是不是你的DNA浓度有问题
之后，我要提醒一下你，是不是你成像系统亮度调节问题
再次，你确定你PCR没有问题？
最后，自习核查一下你配PCR体系的时候每一种样品是不是都有用！有没有过期！有没有漏加，有没有多加！
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谎言和真实在河边洗澡，谎言先洗好，穿走了真实的衣服，真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言，却很难接受赤裸裸的真实。
9楼2009-10-28 14:14:32
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j2

木虫 (正式写手)
是否都混匀了再加的？
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
10楼2009-10-28 16:18:16
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