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sulining

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR结果麻烦大家帮忙分析一下

原来做预实验时DNA都可以扩增出来,现在只是个别能扩增出来,不知道是这么原因啊,DNA的质量很好,麻烦大家分析一下。有的扩增的还很淡

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-31 at 22:56 ]
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zhaohui-eric

木虫 (著名写手)

提高循环数,换新Taq酶试一试


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提高循环数,换新Taq酶试一试
2楼2009-10-19 11:03:35
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 10-19 12:50
循环数提高效果不一定好吧
建议回顾一下 看看某些试剂或操作是否有问题
海纳百川止于至善
3楼2009-10-19 12:46:40
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bioxixi

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
常事
建议体系不要一次混太多,几个一组就好了
再就是操作仔细点儿  
再就是要保证耗材、仪器都没有问题
4楼2009-10-19 13:38:24
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小小豆豆

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
对前后的体系进行对比,看看哪些环节有差别,应该就是那个环节的问题
5楼2009-10-19 14:29:24
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也遇到这样的问题,体系是先mix后分装P的,有几管没P出来,怀疑是样品台有的孔出了问题。
Thank-you,so-blue.
6楼2009-10-19 16:59:39
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yxx41

金虫 (小有名气)

我一直都是这个问题啊,没办法,拖了很久,最后就出来一个算一个,做的是土壤的DNA,用的是手提法,因为老板不会同意我买2500的Qiagen的试剂盒的……
内事不决问百度,外事不决问Google,横批:wikipedia
7楼2009-10-19 22:14:54
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Entrez1110


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
混合再分管,有时会出现这种情况!
为了解决这个问题,我是一管管加组分。
8楼2009-10-19 22:20:21
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qqsvery

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
首先,marker很亮,所以不是EB的问题,
然后,只有个别有条带,说明你点样的时候应该都加进去了
其次,有带的样不是很亮,是不是你的DNA浓度有问题
之后,我要提醒一下你,是不是你成像系统亮度调节问题
再次,你确定你PCR没有问题?
最后,自习核查一下你配PCR体系的时候每一种样品是不是都有用!有没有过期!有没有漏加,有没有多加!
谎言和真实在河边洗澡,谎言先洗好,穿走了真实的衣服,真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言,却很难接受赤裸裸的真实。
9楼2009-10-28 14:14:32
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j2

木虫 (正式写手)

是否都混匀了再加的?
修炼ing,当虫仙……
10楼2009-10-28 16:18:16
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