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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR反应两条引物Tm值相差很多怎么办？
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

[交流] PCR反应两条引物Tm值相差很多怎么办？

PCR反应时，两条引物Tm值相差很多。大家都是怎么选择的？选择中间值还是怎样？谢谢各位！
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1楼 2009-10-19 09:29:41
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-10-19 17:08:
其实我觉得影响不大，每次我都不按照Tm值PCR都，一般都用55℃拉，一般都可以拉的出来，不行的话就降低一下退火温度。

我用降落PCR  79到63  每个循环降0.5  没有出来条带   

又做了梯度PCR，从56到61  还是没有条带-------
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25楼2009-10-23 16:38:57
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2009-10-19 09:31:
按低的算

按 低的Tm-5吗？
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3楼2009-10-19 09:35:19
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
P一下试试，不能P出来就重新设计了。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-10-19 10:18:30
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by hihoney at 2009-10-19 10:18:
P一下试试，不能P出来就重新设计了。

初次做，感觉还是蛮担心的
赞一下 回复此楼
5楼2009-10-19 10:22:24
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