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yanzi3996

金虫 (小有名气)

[交流] 【讨论】蛋白质标准曲线

我用紫外分光光度计做牛血清蛋白BSA的标准曲线时,用的参比液是配置溶液的缓冲溶液,比色皿是1cm的石英比色皿,但是做出来的标准曲线不过原点,一对比色皿都用参比液,发现一个比色皿的吸光度为0,另一个的为0.021,这是为什么,应该都是0才对的,是不是这个原因得到的标准曲线不过原点,虫友们指点一下!
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dx109

铁杆木虫 (著名写手)

★
yanzi3996(金币+1,VIP+0):明白,我也这么想的 10-18 21:44
不是比色皿干净不干净的问题,原配的一对比色皿都会存在楼主说的现象,一般叫做"杯差";没有说标准曲线一定要过原点啊,即使你用溶剂调零或者做参比,得出的标准曲线都或多或少的有一点截距的!
9楼2009-10-17 22:44:22
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ziwoxiang

银虫 (正式写手)

★
yanzi3996(金币+1,VIP+0): 10-17 07:56
实验误差吧,不太懂
2楼2009-10-16 19:18:15
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rava

金虫 (小有名气)

★ ★
zeng1986kai(金币+2,VIP+0):谢谢应助! 10-16 21:22
用的是Bradford方法?比色皿没有清洗干净,在铬酸溶液里浸泡清洗后再用,如果上面有残留蛋白的话,当然会影响测定,结合考马斯亮蓝后会在595nm处产生吸收,这样标准曲线不过原点。
3楼2009-10-16 21:02:14
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王健

木虫 (小有名气)

标曲一定要过原点吗?
4楼2009-10-16 21:42:13
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