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Tina2009

铜虫 (小有名气)

[交流] 提取粗酶液的离心速度可以用多大

我用摇瓶发酵真菌,然后取菌液提取粗酶液,测纤维素酶的活性。在文献上看到,制取粗酶液,有用3000r/min离心15min的,
4000r/min离心15min的,
5000r/min离心8min的,
10000r/min离心15min的。
我之前都是用13000r/min离心3min的。
请问各位虫友,这离心速度高低对去除菌体以及对纤维素酶的活性有没有影响啊?你们都用的哪个速度呀?要在低温下进行吗?谢谢了哦。
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

一般都要4度离心吧,不然可能会导致酶失活的。
4楼2009-10-16 23:09:26
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delia1013

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没做过,不过我看你用13000离15分钟吧,比较保险,4度喽~~
2楼2009-10-16 17:00:43
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missu

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
离心速度对你的酶应该不会有太大影响的
倒是会影响你的菌体状态。
13000rpm会破坏细胞的,如果离心的目的是去除培养基换液,用3000-4000rpm就够了,如果你的蛋白是分泌到培养基中的,10000rpm以上可以去除大部分菌体,这对你下游纯化来说是必须的
所以还是看你的目的
3楼2009-10-16 17:38:52
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Tina2009

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by missu at 2009-10-16 17:38:
离心速度对你的酶应该不会有太大影响的
倒是会影响你的菌体状态。
13000rpm会破坏细胞的,如果离心的目的是去除培养基换液,用3000-4000rpm就够了,如果你的蛋白是分泌到培养基中的,10000rpm以上可以去除大部分 ...

我的目的是提取粗酶液,也就是要去掉菌体,取上清液。
嗯,回答很好,谢谢交流呵呵。
5楼2009-10-17 18:59:21
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