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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 提取粗酶液的离心速度可以用多大
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Tina2009

铜虫 (小有名气)

[交流] 提取粗酶液的离心速度可以用多大

我用摇瓶发酵真菌，然后取菌液提取粗酶液，测纤维素酶的活性。在文献上看到，制取粗酶液，有用3000r/min离心15min的，
4000r/min离心15min的，
5000r/min离心8min的，
10000r/min离心15min的。
我之前都是用13000r/min离心3min的。
请问各位虫友，这离心速度高低对去除菌体以及对纤维素酶的活性有没有影响啊？你们都用的哪个速度呀？要在低温下进行吗？谢谢了哦。
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1楼 2009-10-16 16:37:01
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delia1013

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没做过，不过我看你用13000离15分钟吧，比较保险，4度喽~~
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2楼2009-10-16 17:00:43
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missu

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
离心速度对你的酶应该不会有太大影响的
倒是会影响你的菌体状态。
13000rpm会破坏细胞的，如果离心的目的是去除培养基换液，用3000-4000rpm就够了，如果你的蛋白是分泌到培养基中的，10000rpm以上可以去除大部分菌体，这对你下游纯化来说是必须的
所以还是看你的目的
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3楼2009-10-16 17:38:52
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
一般都要4度离心吧，不然可能会导致酶失活的。
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4楼2009-10-16 23:09:26
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Tina2009

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by missu at 2009-10-16 17:38:
离心速度对你的酶应该不会有太大影响的
倒是会影响你的菌体状态。
13000rpm会破坏细胞的，如果离心的目的是去除培养基换液，用3000-4000rpm就够了，如果你的蛋白是分泌到培养基中的，10000rpm以上可以去除大部分 ...

我的目的是提取粗酶液，也就是要去掉菌体，取上清液。
嗯，回答很好，谢谢交流呵呵。
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5楼2009-10-17 18:59:21
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Tina2009

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-10-16 23:09:
一般都要4度离心吧，不然可能会导致酶失活的。

哦，晓得了，谢谢哦。
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6楼2009-10-17 19:00:27
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zier1011

木虫 (著名写手)
有一段时间不做了，我记得好像是5000转，我当时离得是酵母菌
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花还香香的
7楼2009-10-17 23:31:25
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