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构建载体的问题！请教各位！
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| 我要构建三个表达载体，载体用的是PKYLX71，分别连三个DNA片段（PCR扩增出来的）。用HindIII和XhoI双酶切后连接，最大和最小的片段都连上了，但是600多K的那个一直连不上，载体应该没问题，同样的反应体系另两个就连上了。引物的酶切位点我没设计错，请问还有什么原因会导致我连不上呢？有什么解决方法吗？谢谢！ |
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