24小时热门版块排行榜    

查看: 1288  |  回复: 7
【悬赏金币】回答本帖问题,作者虾须镯将赠送您 5 个金币

虾须镯

新虫 (小有名气)

[求助] 替换35s启动子 已有1人参与

第一次替换启动子。我想替换1300的35s连接别的启动子,我的酶切位点就选Bstx和AatII吗?

替换35s启动子


发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天照小星星

新虫 (小有名气)

加我v18466397189 讨论讨论 1.要看下这两酶切序列是否相近相同

发自小木虫Android客户端
2楼2024-02-23 23:07:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天照小星星

新虫 (小有名气)

加我v18466397189 讨论讨论? 2.替换的启动子是否也具备这两个酶切位点 3,替换的启动子是否与下游promoter配套

发自小木虫Android客户端
3楼2024-02-23 23:10:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AD_com

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以选择EcoRI,实际这个软件注释的35S要短一些,换句话说,EcoRI前面的一部分序列也是35S的,用哪个酶没关系,关键是是不是效率高,虽然是唯一酶切位点,但是这个酶不好买、贵、效率不高等都是限制使用因素
4楼2024-02-24 10:07:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虾须镯

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by AD_com at 2024-02-24 10:07:26
可以选择EcoRI,实际这个软件注释的35S要短一些,换句话说,EcoRI前面的一部分序列也是35S的,用哪个酶没关系,关键是是不是效率高,虽然是唯一酶切位点,但是这个酶不好买、贵、效率不高等都是限制使用因素

替换启动子是不是不能单酶切,那我另一个选择什么比较好呀

发自小木虫Android客户端
5楼2024-02-24 18:56:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AD_com

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 虾须镯 at 2024-02-24 18:56:15
替换启动子是不是不能单酶切,那我另一个选择什么比较好呀
...

可以单酶切啊,前提是启动子前后都有这个酶切位点,而且单酶切以后要是用T4连接的话自连非常严重,可以考虑同源重组。
6楼2024-02-25 12:26:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虾须镯

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by AD_com at 2024-02-25 12:26:47
可以单酶切啊,前提是启动子前后都有这个酶切位点,而且单酶切以后要是用T4连接的话自连非常严重,可以考虑同源重组。...

谢谢您,我想问问我打算双酶切然后同源重组,因为我看我这个启动子只有一端有Ecor1,另一端还不知道用什么切

发自小木虫Android客户端
7楼2024-02-25 16:20:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AD_com

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 虾须镯 at 2024-02-25 16:20:13
谢谢您,我想问问我打算双酶切然后同源重组,因为我看我这个启动子只有一端有Ecor1,另一端还不知道用什么切
...

后面那俩都行,就看你们实验室有哪个或者看看哪一个好买,这种不常用的酶我都没用过,最简单的是找公司问问就行了。按理说这个载体的35S后面会有XmaI或者Smal这种酶切位点的,你这为啥没有。
8楼2024-02-25 16:46:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 虾须镯 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:31 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 11/550 2026-08-23 02:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +11 羊腰板 2026-08-21 11/550 2026-08-22 22:03 by lsbin3733
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见