应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 替换35s启动子
81/1返回列表
查看: 1454  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者虾须镯将赠送您 5 个金币

虾须镯

新虫 (小有名气)

[求助] 替换35s启动子 已有1人参与

第一次替换启动子。我想替换1300的35s连接别的启动子，我的酶切位点就选Bstx和AatII吗？

替换35s启动子


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2024-02-23 17:52:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天照小星星

新虫 (小有名气)
加我v18466397189 讨论讨论 1.要看下这两酶切序列是否相近相同

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2024-02-23 23:07:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天照小星星

新虫 (小有名气)
加我v18466397189 讨论讨论? 2.替换的启动子是否也具备这两个酶切位点 3，替换的启动子是否与下游promoter配套

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2024-02-23 23:10:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AD_com

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以选择EcoRI，实际这个软件注释的35S要短一些，换句话说，EcoRI前面的一部分序列也是35S的，用哪个酶没关系，关键是是不是效率高，虽然是唯一酶切位点，但是这个酶不好买、贵、效率不高等都是限制使用因素
赞一下 回复此楼
4楼2024-02-24 10:07:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虾须镯

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by AD_com at 2024-02-24 10:07:26
可以选择EcoRI，实际这个软件注释的35S要短一些，换句话说，EcoRI前面的一部分序列也是35S的，用哪个酶没关系，关键是是不是效率高，虽然是唯一酶切位点，但是这个酶不好买、贵、效率不高等都是限制使用因素

替换启动子是不是不能单酶切，那我另一个选择什么比较好呀

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2024-02-24 18:56:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AD_com

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 虾须镯 at 2024-02-24 18:56:15
替换启动子是不是不能单酶切，那我另一个选择什么比较好呀
...

可以单酶切啊，前提是启动子前后都有这个酶切位点，而且单酶切以后要是用T4连接的话自连非常严重，可以考虑同源重组。
赞一下 回复此楼
6楼2024-02-25 12:26:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虾须镯

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by AD_com at 2024-02-25 12:26:47
可以单酶切啊，前提是启动子前后都有这个酶切位点，而且单酶切以后要是用T4连接的话自连非常严重，可以考虑同源重组。...

谢谢您，我想问问我打算双酶切然后同源重组，因为我看我这个启动子只有一端有Ecor1，另一端还不知道用什么切

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2024-02-25 16:20:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AD_com

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 虾须镯 at 2024-02-25 16:20:13
谢谢您，我想问问我打算双酶切然后同源重组，因为我看我这个启动子只有一端有Ecor1，另一端还不知道用什么切
...

后面那俩都行，就看你们实验室有哪个或者看看哪一个好买，这种不常用的酶我都没用过，最简单的是找公司问问就行了。按理说这个载体的35S后面会有XmaI或者Smal这种酶切位点的，你这为啥没有。
赞一下 回复此楼
8楼2024-02-25 16:46:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 虾须镯 的主题更新
81/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 05:54 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 05:44 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:43 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 8/400 2026-11-06 05:22 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:21 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:15 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 19/950 2026-11-06 04:38 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 4/200 2026-11-06 02:37 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:26 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭