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qingqingcao288

木虫 (小有名气)

[交流] 求助 基因工程菌保藏问题 已有1人参与

如题,关于大肠杆菌基因工程菌一直不知道如何保藏以保持其原有的活性,我们常用甘油管,但放几个月后产酶水平就会下降,做冷冻管,经验证均不能产酶或产酶很少,远没有达到原始水平,各位大侠能够指点一二,万分感谢。
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houcaixia

金虫 (小有名气)

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amisking(金币+2,VIP+0): 10-16 20:40
啊?是么?我们也一直都用甘油管保存的,没有注意到这个问题。我不知道你是怎么摇菌的,一般情况下我们都是用保存在负20度的菌液先摇一点种子,然后再摇菌的,这样的话应该可以充分激活细胞,保持细胞原有的活性,楼主可以试一下。
2楼2009-10-14 21:17:30
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qingqingcao288

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by houcaixia at 2009-10-14 21:17:
啊?是么?我们也一直都用甘油管保存的,没有注意到这个问题。我不知道你是怎么摇菌的,一般情况下我们都是用保存在负20度的菌液先摇一点种子,然后再摇菌的,这样的话应该可以充分激活细胞,保持细胞原有的活性, ...

那你们用甘油管可以保藏多久呢?我们是从甘油管先接到LB活化,然后才转到发酵培养基的,发现以上的问题
3楼2009-10-16 09:39:15
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fgwx

金虫 (正式写手)

★
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要放几个月的话,建议放到-80度比较好,先用液氮瞬时冻一下。
4楼2009-10-16 12:14:36
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agtc

至尊木虫 (著名写手)

冷冻抽干,真空保存。
慢慢的走是为了走的更远!
5楼2009-10-16 12:56:35
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qingqingcao288

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by agtc at 2009-10-16 12:56:
冷冻抽干,真空保存。

我们用过冻干管的,效果不好
6楼2009-10-16 16:27:46
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川

★
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液氮保存 好多工厂都是如此的
海纳百川止于至善
7楼2009-10-16 20:22:15
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主

容易变异的菌种还是利用液氮等超低温保存!
如果没有人帮助你,那么你就去帮助别人。
8楼2009-10-16 20:41:20
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qingqingcao288

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by amisking at 2009-10-16 20:41:
容易变异的菌种还是利用液氮等超低温保存!

液氮保存相对冷冻管有什么优势吗
9楼2009-10-16 23:15:43
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houcaixia

金虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一般情况下我们保藏时间比较短,而且保藏时间长的都在-80放着,你们不是也活化菌种么?那样的话效果应该不错才对啊,要不你们换一下培养基,我们现在用的培养基有SOB的,配方你可以上网搜一下。
10楼2009-10-17 09:23:28
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