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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR的问题
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liujichao

金虫 (正式写手)

[交流] PCR的问题

各位虫友帮帮忙：本人在做PCR，已经P出来了目的带了，我在相同的条件下又做了一次重复试验，为什么又没有目的带了啊？着急啊，请各位虫友快给指导一下啊!!
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1楼 2009-10-14 14:39:45
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
liujichao(金币+1,VIP+0): 10-14 15:41
多重复几次试试，确定反应体系没有漏加东西。
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Thank-you，so-blue.
2楼2009-10-14 15:03:29
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connexin

金虫 (小有名气)
★
liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 08:38
PCR这种情况好像很常见啊
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3楼2009-10-14 15:05:55
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骚人追月

金虫 (小有名气)
★
liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 08:38
重新做几次，难道是模板降解了？你的模板是什么
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会做饭就会做实验？
4楼2009-10-15 08:29:58
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liujichao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 骚人追月 at 2009-10-15 08:29:
重新做几次，难道是模板降解了？你的模板是什么

重复了三次了，模板3ul
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5楼2009-10-15 08:38:19
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bioxixi

木虫 (著名写手)
★
liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 14:53
这种情况很普遍 再做几次就是了  模板不用加太多吧
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6楼2009-10-15 09:31:55
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wlwhappy

银虫 (正式写手)
★
liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 14:53
很正常的，通常是体系出了问题，dNTP\buffer\酶、引物，等等，都有可能，换试剂重做看看。
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7楼2009-10-15 10:04:16
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himoo123

铁虫 (小有名气)
★
liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 14:53
是啊 正常啊~！！如果试剂和上次一样的话，那应该是可能你的引物本身就有问题，第一次的可能就是假阳性！
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8楼2009-10-15 10:23:27
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himoo123

铁虫 (小有名气)
★
liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 14:53
模版降解的可能性应该不大。。
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9楼2009-10-15 10:24:09
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oyjenvol

金虫 (小有名气)
★
liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 14:53
可能原因：
1，缓冲液不干净，造成误差；
2，换了模板，模板的浓度有差异；
3，实验操作问题。
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我思故我存在！
10楼2009-10-15 12:38:46
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