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liujichao

金虫 (正式写手)

[交流] PCR的问题

各位虫友帮帮忙:本人在做PCR,已经P出来了目的带了,我在相同的条件下又做了一次重复试验,为什么又没有目的带了啊?着急啊,请各位虫友快给指导一下啊!!
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


liujichao(金币+1,VIP+0): 10-14 15:41
多重复几次试试,确定反应体系没有漏加东西。
Thank-you,so-blue.
2楼2009-10-14 15:03:29
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connexin

金虫 (小有名气)


liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 08:38
PCR这种情况好像很常见啊
3楼2009-10-14 15:05:55
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骚人追月

金虫 (小有名气)


liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 08:38
重新做几次,难道是模板降解了?你的模板是什么
会做饭就会做实验?
4楼2009-10-15 08:29:58
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liujichao

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 骚人追月 at 2009-10-15 08:29:
重新做几次,难道是模板降解了?你的模板是什么

重复了三次了,模板3ul
5楼2009-10-15 08:38:19
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bioxixi

木虫 (著名写手)


liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 14:53
这种情况很普遍 再做几次就是了  模板不用加太多吧
6楼2009-10-15 09:31:55
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wlwhappy

银虫 (正式写手)


liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 14:53
很正常的,通常是体系出了问题,dNTP\buffer\酶、引物,等等,都有可能,换试剂重做看看。
7楼2009-10-15 10:04:16
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himoo123

铁虫 (小有名气)


liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 14:53
是啊 正常啊~!!如果试剂和上次一样的话,那应该是可能你的引物本身就有问题,第一次的可能就是假阳性!
8楼2009-10-15 10:23:27
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himoo123

铁虫 (小有名气)


liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 14:53
模版降解的可能性应该不大。。
9楼2009-10-15 10:24:09
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oyjenvol

金虫 (小有名气)


liujichao(金币+1,VIP+0): 10-15 14:53
可能原因:
1,缓冲液不干净,造成误差;
2,换了模板,模板的浓度有差异;
3,实验操作问题。
我思故我存在!
10楼2009-10-15 12:38:46
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