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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教一个PCR方面的问题
汕头大学海洋科学接受调剂
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rack85

金虫 (正式写手)

小号超人

[交流] 请教一个PCR方面的问题

向各位虫友请教一个PCR方面的问题，由于本人刚接触PCR，甚是迷茫，请各位不吝赐教，上问题：
实验是做真菌转化的，获得了4个比较典型的突变体，想用PCR的方法来验证。突变体基因组中应该被转入了氨苄抗性基因和潮霉素抗性基因，我根据这两个基因的序列设计了引物，对野生型菌株、突变体和灭菌水进行PCR。结果P了两次，每个泳道都出现了一条很亮的条带，连水里都能P出来。甚是不解。
希望各位高手赐教。万分感谢！
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1楼 2009-10-14 10:57:37
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jjlbest

木虫 (著名写手)
★
350784478(金币+1,VIP+0):谢谢参与 10-18 09:29
PCR试剂有污染！
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2楼2009-10-14 13:15:12
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★ ★
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连水都能P出来，那就是当中那一东西有污染，污染
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2009-10-14 13:22:49
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delia1013

木虫 (著名写手)
★
350784478(金币+1,VIP+0):谢谢参与 10-18 09:29
肯定污染啦
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4楼2009-10-14 13:25:03
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崔红利

新虫 (正式写手)
★ ★
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350784478(金币+1,VIP+0):谢谢参与 10-18 09:29
不错应该是污染啦  一切都换成还是新的试机再试试  实在不行的话就是让别人帮着自己做一次吧    分子生物学的试验有时候就是很奇怪的
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5楼2009-10-14 13:33:46
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rack85

金虫 (正式写手)

小号超人
引用回帖:
Originally posted by jjlbest at 2009-10-14 13:15:
PCR试剂有污染！

谢谢，我再试试看。
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6楼2009-10-14 14:03:24
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fungi1205

金虫 (正式写手)
应该是污染啦
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加油，发挥人生最大的热量温暖身边的人
7楼2009-10-18 01:52:01
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houcaixia

金虫 (小有名气)
★ ★
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350784478(金币+1,VIP+0):谢谢参与 10-18 09:30
那就是PCR污染，你可以试验一下，把水重新做一次PCR，再准备一管新的灭菌水（最好用纯水做），比较一下是否污染。再将另外两管菌液也做一个PCR，最好枪头不要混了，各用各的。
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8楼2009-10-18 09:19:35
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rack85

金虫 (正式写手)

小号超人
引用回帖:
Originally posted by houcaixia at 2009-10-18 09:19:
那就是PCR污染，你可以试验一下，把水重新做一次PCR，再准备一管新的灭菌水（最好用纯水做），比较一下是否污染。再将另外两管菌液也做一个PCR，最好枪头不要混了，各用各的。

好的，我已经试了下，是污染了。谢谢
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9楼2009-10-18 19:43:46
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