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rack85

金虫 (正式写手)

小号超人

[交流] 请教一个PCR方面的问题

向各位虫友请教一个PCR方面的问题,由于本人刚接触PCR,甚是迷茫,请各位不吝赐教,上问题:
实验是做真菌转化的,获得了4个比较典型的突变体,想用PCR的方法来验证。突变体基因组中应该被转入了氨苄抗性基因和潮霉素抗性基因,我根据这两个基因的序列设计了引物,对野生型菌株、突变体和灭菌水进行PCR。结果P了两次,每个泳道都出现了一条很亮的条带,连水里都能P出来。甚是不解。
希望各位高手赐教。万分感谢!
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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连水都能P出来,那就是当中那一东西有污染,污染
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2009-10-14 13:22:49
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崔红利

新虫 (正式写手)

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不错应该是污染啦  一切都换成还是新的试机再试试  实在不行的话就是让别人帮着自己做一次吧    分子生物学的试验有时候就是很奇怪的
5楼2009-10-14 13:33:46
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rack85

金虫 (正式写手)

小号超人

引用回帖:
Originally posted by jjlbest at 2009-10-14 13:15:
PCR试剂有污染!

谢谢,我再试试看。
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6楼2009-10-14 14:03:24
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houcaixia

金虫 (小有名气)

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那就是PCR污染,你可以试验一下,把水重新做一次PCR,再准备一管新的灭菌水(最好用纯水做),比较一下是否污染。再将另外两管菌液也做一个PCR,最好枪头不要混了,各用各的。
8楼2009-10-18 09:19:35
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