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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取树突状细胞
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Nidayezz

新虫 (初入文坛)
我们一般用小鼠的腿提，一般两只小鼠就行，离心的时候应该细胞还是有那么多，中

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21楼2024-02-01 18:22:51
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实验痛苦中

新虫 (小有名气)
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21楼: Originally posted by Nidayezz at 2024-02-01 18:22:51
我们一般用小鼠的腿提，一般两只小鼠就行，离心的时候应该细胞还是有那么多，中

我一开始是三只老鼠铺六孔板的，但是第七天收集的时候，没有细胞沉淀，我中间进行了两次半量换液

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22楼2024-02-01 19:23:32
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实验痛苦中

新虫 (小有名气)
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21楼: Originally posted by Nidayezz at 2024-02-01 18:22:51
我们一般用小鼠的腿提，一般两只小鼠就行，离心的时候应该细胞还是有那么多，中

你们提完细胞，会送去做个细胞流式检测吗，如果检测，是要检测那些指标，这些指标达到多少是属于合格，可以进行下面细胞实验

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23楼2024-02-01 19:24:53
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Nidayezz

新虫 (初入文坛)
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23楼: Originally posted by 实验痛苦中 at 2024-02-01 19:24:53
你们提完细胞，会送去做个细胞流式检测吗，如果检测，是要检测那些指标，这些指标达到多少是属于合格，可以进行下面细胞实验
...

我们是直接培养几天就开始做一些体外实验，主要是要的BMDC,用的IL4和cfse进行诱导的，然后看你实验目的吧，做一些surface marker,流式看看CD80 CD86这些

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24楼2024-02-01 20:12:30
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel
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20楼: Originally posted by 实验痛苦中 at 2024-02-01 14:41:31
我就是收集细胞，做一系列的细胞实验，例如细胞毒性，成熟，摄取这样的，我看别人都是培养六七天这样的收集，因为从小鼠提取的原代，里面会有巨噬细胞，淋巴细胞这些，通过换液，可以剔除这些细胞
...

建议多做点，然后收集用的靠流式，顺带培养点拍照用，我的意思明白了没

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25楼2024-02-01 20:33:26
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实验痛苦中

新虫 (小有名气)
引用回帖:
24楼: Originally posted by Nidayezz at 2024-02-01 20:12:30
我们是直接培养几天就开始做一些体外实验，主要是要的BMDC,用的IL4和cfse进行诱导的，然后看你实验目的吧，做一些surface marker,流式看看CD80 CD86这些
...

不会先送去流式检测一下吗，然后看一下指标，再决定要不要做下面的实验，我也没有做过，我也是从网上找人问的，说提完细胞，收集的时候送去流式检测一下，然后再做后面的实验

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26楼2024-02-02 13:17:19
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实验痛苦中

新虫 (小有名气)
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25楼: Originally posted by xn8008 at 2024-02-01 20:33:26
建议多做点，然后收集用的靠流式，顺带培养点拍照用，我的意思明白了没
...

我知道多弄点，但是我这次都提了九只老鼠铺六孔板，第五天换液还有不少细胞沉淀，第七天收集的时候就损失了很多，可是我第五天也没有丢弃细胞沉淀，按道理来说，不应该会损失那么多，而且第七天低俗离心不下来，第五天我是低俗离心下来的，我很想知道这个原因是什么，我后面重新提细胞，是不是不进行第五天换液了，直接全量换液一次，后面到时间直接收集

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27楼2024-02-02 13:21:05
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实验痛苦中

新虫 (小有名气)
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25楼: Originally posted by xn8008 at 2024-02-01 20:33:26
建议多做点，然后收集用的靠流式，顺带培养点拍照用，我的意思明白了没
...

因为我这边没有人提过原代细胞，我也是从网上找人问的，人家说收集的时候送去流式检测一下cd11c和cd45，然后再去做其他的细胞实验，这个是必须的吗，不能收集完直接去做细胞实验，因为我这次就测了一个cd11c，数值特别低，只有十左右，这是代表细胞不成熟吗，还是其他，会影响后面细胞实验嘛

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28楼2024-02-02 13:24:10
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Nidayezz

新虫 (初入文坛)
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26楼: Originally posted by 实验痛苦中 at 2024-02-02 13:17:19
不会先送去流式检测一下吗，然后看一下指标，再决定要不要做下面的实验，我也没有做过，我也是从网上找人问的，说提完细胞，收集的时候送去流式检测一下，然后再做后面的实验
...

cd11c是DC的marker,cd45是免疫细胞的marker，我们是做完要做的实验之后才会跑流式，在流式里面圈cd45阳性的细胞之后再去圈cd11c阳性的细胞。建议你找一个protocol好好看看

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29楼2024-02-02 15:29:38
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实验痛苦中

新虫 (小有名气)
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29楼: Originally posted by Nidayezz at 2024-02-02 15:29:38
cd11c是DC的marker,cd45是免疫细胞的marker，我们是做完要做的实验之后才会跑流式，在流式里面圈cd45阳性的细胞之后再去圈cd11c阳性的细胞。建议你找一个protocol好好看看
...

我看了一些文献，有英文的有中文的，英文里面没有提细胞的步骤，只有中文的里面有，但是也没有做这些检测，好像直接做实验了

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30楼2024-02-03 12:22:30
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