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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取树突状细胞
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实验痛苦中

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by xn8008 at 2024-01-26 00:29:08
换液每次留下十分之一原液，有利于生长
...

我全量换液的时候，留了大概500ul，半量换液的时候，留了细胞沉淀和一半的上清，这时候细胞沉淀也很多，但是我第七天收集的时候，发现细胞沉淀就很少了，以第五天那个离心转速根本无法离心下来，然后我加大转速到3500，才可以的，但是送去检测cd11c，数值特别低，只有十左右，而且碎片很多

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11楼2024-01-26 11:15:45
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel
引用回帖:
11楼: Originally posted by 实验痛苦中 at 2024-01-26 11:15:45
我全量换液的时候，留了大概500ul，半量换液的时候，留了细胞沉淀和一半的上清，这时候细胞沉淀也很多，但是我第七天收集的时候，发现细胞沉淀就很少了，以第五天那个离心转速根本无法离心下来，然后我加大转速到3 ...

你离线劲大了，别超过2000

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12楼2024-01-27 09:47:35
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实验痛苦中

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by xn8008 at 2024-01-27 09:47:35
你离线劲大了，别超过2000
...

是因为离心转速过大，导致细胞碎片过多是吗，细胞碎片过多是不是会影响测的数据，我还有一个疑问，就是我第五天半量换液的时候，细胞沉淀还有很多，低速离心下来的，但是到了第七天我收集的时候，反而不行了，细胞沉淀也是少了一大半，这是为啥呀

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13楼2024-01-27 17:30:54
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel
引用回帖:
13楼: Originally posted by 实验痛苦中 at 2024-01-27 17:30:54
是因为离心转速过大，导致细胞碎片过多是吗，细胞碎片过多是不是会影响测的数据，我还有一个疑问，就是我第五天半量换液的时候，细胞沉淀还有很多，低速离心下来的，但是到了第七天我收集的时候，反而不行了，细胞 ...

收集完尽快收集数据，不要培养起来没完没了

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14楼2024-01-27 19:52:49
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实验痛苦中

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by xn8008 at 2024-01-27 19:52:49
收集完尽快收集数据，不要培养起来没完没了
...

我是培养七天的，第三天全量换液了一次，第五天半量换液，准备第七天收集的，但是发现第五天半量换液的时候细胞沉淀很多，第七天收集的时候就没有那么多了，我第五天的细胞沉淀也没有不要，我是又重悬了放回去，再加点新鲜培养基的，所以我很遗憾为啥会损失那么多

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15楼2024-01-28 14:43:14
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天照小星星

新虫 (小有名气)
加我微信18466397189进行讨论  可以放大40x 100x看下细胞形态

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16楼2024-01-28 22:38:01
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel
引用回帖:
15楼: Originally posted by 实验痛苦中 at 2024-01-28 14:43:14
我是培养七天的，第三天全量换液了一次，第五天半量换液，准备第七天收集的，但是发现第五天半量换液的时候细胞沉淀很多，第七天收集的时候就没有那么多了，我第五天的细胞沉淀也没有不要，我是又重悬了放回去，再 ...

我们一般都是培养五天再换液，其实五天的时候你看看结果，如果贴壁了就收，三天有点短，而且要少看

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17楼2024-01-31 03:41:02
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实验痛苦中

新虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by xn8008 at 2024-01-31 03:41:02
我们一般都是培养五天再换液，其实五天的时候你看看结果，如果贴壁了就收，三天有点短，而且要少看
...

树突状细胞不是前面三四天是贴壁，后面就变成半贴壁或者悬浮吗

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18楼2024-01-31 09:24:55
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel
引用回帖:
18楼: Originally posted by 实验痛苦中 at 2024-01-31 09:24:55
树突状细胞不是前面三四天是贴壁，后面就变成半贴壁或者悬浮吗
...

看你目的是什么，如果转染之类的你需要贴壁，如果收集细胞，尽快吧

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19楼2024-02-01 01:13:18
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实验痛苦中

新虫 (小有名气)
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19楼: Originally posted by xn8008 at 2024-02-01 01:13:18
看你目的是什么，如果转染之类的你需要贴壁，如果收集细胞，尽快吧
...

我就是收集细胞，做一系列的细胞实验，例如细胞毒性，成熟，摄取这样的，我看别人都是培养六七天这样的收集，因为从小鼠提取的原代，里面会有巨噬细胞，淋巴细胞这些，通过换液，可以剔除这些细胞

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20楼2024-02-01 14:41:31
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