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vivion

金虫 (小有名气)

[交流] 请教蛋白电泳问题

SDS-PAGE电泳中,样品处理时作了加热与不加热对比,结果显示不加热的样品出现三条带,而经加热后的样品却在这三条带之上出现许多条带,即出现了许多条分子量大的条带,不清楚是何原因?请高人帮我解释!十分感谢!

[ Last edited by amisking on 2009-10-13 at 13:04 ]
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pamela9838

铜虫 (小有名气)


vivion(金币+1):谢谢参与
你加热到多少度啊,是不是蛋白质加热之后有部分变性了,不能与SDS结合,而未变性的蛋白质与SDS结合后带有大量的负电荷,电泳过程中泳动速度较快,跑在前面。而跑在后面的不一定分子量要比前面的大。我也是猜的,你还是请教一下老师,记得给我们一个更有依据的答案哦
3楼2009-10-13 13:18:03
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nn0808

银虫 (小有名气)


vivion(金币+1):谢谢参与
加热后有些蛋白会变性沉淀,要进行离心分离除去,不然就会出现你说的情况了.
2楼2009-10-13 13:13:06
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connexin

金虫 (小有名气)


vivion(金币+1):谢谢参与
加热后高速离心去沉淀,迅速冰浴
4楼2009-10-13 14:15:02
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by vivion at 2009-10-13 13:02:
SDS-PAGE电泳中,样品处理时作了加热与不加热对比,结果显示不加热的样品出现三条带,而经加热后的样品却在这三条带之上出现许多条带,即出现了许多条分子量大的条带,不清楚是何原因?请高人帮我解释!十分感谢! ...

哈哈哈哈。。。很可能是你没有加热的那个样品里面,
高分子量的蛋白根本没有跑到胶里面去!

而充分SDS变性的蛋白分子,可以更有效地移动,进入到分离胶里面了!
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2009-10-13 15:12:42
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