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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教蛋白电泳问题
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vivion

金虫 (小有名气)

[交流] 请教蛋白电泳问题

SDS-PAGE电泳中，样品处理时作了加热与不加热对比，结果显示不加热的样品出现三条带，而经加热后的样品却在这三条带之上出现许多条带，即出现了许多条分子量大的条带，不清楚是何原因？请高人帮我解释！十分感谢！

[ Last edited by amisking on 2009-10-13 at 13:04 ]
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1楼 2009-10-13 13:02:21
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nn0808

银虫 (小有名气)
★
vivion(金币+1):谢谢参与
加热后有些蛋白会变性沉淀,要进行离心分离除去,不然就会出现你说的情况了.
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2楼2009-10-13 13:13:06
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pamela9838

铜虫 (小有名气)
★
vivion(金币+1):谢谢参与
你加热到多少度啊，是不是蛋白质加热之后有部分变性了，不能与SDS结合，而未变性的蛋白质与SDS结合后带有大量的负电荷，电泳过程中泳动速度较快，跑在前面。而跑在后面的不一定分子量要比前面的大。我也是猜的，你还是请教一下老师，记得给我们一个更有依据的答案哦
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3楼2009-10-13 13:18:03
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connexin

金虫 (小有名气)
★
vivion(金币+1):谢谢参与
加热后高速离心去沉淀，迅速冰浴
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4楼2009-10-13 14:15:02
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by vivion at 2009-10-13 13:02:
SDS-PAGE电泳中，样品处理时作了加热与不加热对比，结果显示不加热的样品出现三条带，而经加热后的样品却在这三条带之上出现许多条带，即出现了许多条分子量大的条带，不清楚是何原因？请高人帮我解释！十分感谢！ ...

哈哈哈哈。。。很可能是你没有加热的那个样品里面，
高分子量的蛋白根本没有跑到胶里面去！

而充分SDS变性的蛋白分子，可以更有效地移动，进入到分离胶里面了！
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2009-10-13 15:12:42
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vivion

金虫 (小有名气)
谢谢了，待我验证
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6楼2009-10-13 19:36:18
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