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科研小努力

新虫 (小有名气)

[交流] 做好细胞冻存,保证细胞质量 已有1人参与

实验步骤


1、吸去旧培养液。

2、PBS冲洗3次,每次2ml。

3、吸去PBS,胰酶1.5ml,放入孵育箱,消化4min后取出观察细胞悬浮情况。

4、3ml培液中止消化,轻轻吹打至底壁透光,制成细胞悬液。

5、吸入15ml离心管中,1000r/5min离心。

6、吸去上清,加入1ml冻存液(冻存液配制方法:DMSO和血清按1:9配制成10ml,离心管外面裹一层铝箔避光,放入4度冰箱保存),吹打均匀,吸入冻存管中。

7、放入梯度降温盒,-80℃冰箱过夜。

8、24h后从梯度盒取出冻存管,放入液氮罐保存(长期保存需放入液氮罐,短期3个月内冻存放入-80摄氏度即可)。
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倾心987

新虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这个胰酶消化时间只适用于某些细胞,大多数细胞不需要这么长,会出现消化过度的现象

发自小木虫Android客户端
2楼2024-01-03 12:47:10
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倾心987

新虫 (著名写手)

且在胰酶消化之后最好再用PBS洗两遍

发自小木虫Android客户端
3楼2024-01-03 12:48:17
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