24小时热门版块排行榜    

查看: 452  |  回复: 2

科研小努力

新虫 (小有名气)

[交流] 做好细胞冻存,保证细胞质量 已有1人参与

实验步骤


1、吸去旧培养液。

2、PBS冲洗3次,每次2ml。

3、吸去PBS,胰酶1.5ml,放入孵育箱,消化4min后取出观察细胞悬浮情况。

4、3ml培液中止消化,轻轻吹打至底壁透光,制成细胞悬液。

5、吸入15ml离心管中,1000r/5min离心。

6、吸去上清,加入1ml冻存液(冻存液配制方法:DMSO和血清按1:9配制成10ml,离心管外面裹一层铝箔避光,放入4度冰箱保存),吹打均匀,吸入冻存管中。

7、放入梯度降温盒,-80℃冰箱过夜。

8、24h后从梯度盒取出冻存管,放入液氮罐保存(长期保存需放入液氮罐,短期3个月内冻存放入-80摄氏度即可)。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

倾心987

新虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这个胰酶消化时间只适用于某些细胞,大多数细胞不需要这么长,会出现消化过度的现象

发自小木虫Android客户端
2楼2024-01-03 12:47:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

倾心987

新虫 (著名写手)

且在胰酶消化之后最好再用PBS洗两遍

发自小木虫Android客户端
3楼2024-01-03 12:48:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 科研小努力 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 352求调剂 +3 大米饭! 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123!
[考研] 310求调剂 +4 baibai1314 2026-03-16 4/200 2026-03-22 20:19 by edmund7
[考研] 招08考数学 +4 laoshidan 2026-03-20 8/400 2026-03-22 19:56 by 小皮蛋酱
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
信息提示
请填处理意见