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做好细胞冻存，保证细胞质量已有1人参与
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实验步骤 1、吸去旧培养液。 2、PBS冲洗3次，每次2ml。 3、吸去PBS，胰酶1.5ml，放入孵育箱，消化4min后取出观察细胞悬浮情况。 4、3ml培液中止消化，轻轻吹打至底壁透光，制成细胞悬液。 5、吸入15ml离心管中，1000r/5min离心。 6、吸去上清，加入1ml冻存液（冻存液配制方法：DMSO和血清按1:9配制成10ml,离心管外面裹一层铝箔避光，放入4度冰箱保存），吹打均匀，吸入冻存管中。 7、放入梯度降温盒，-80℃冰箱过夜。 8、24h后从梯度盒取出冻存管，放入液氮罐保存（长期保存需放入液氮罐，短期3个月内冻存放入-80摄氏度即可）。 |
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