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yanhong2029
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[交流]
如何通过cre/loxp系统去除抗性基因后，提高整合的拷贝数？
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欲将一外源基因整合到枯草芽孢杆菌染色体上，想实现多拷贝整合。 好像cre/loxp系统可以重复利用，这样就可以在整合了片段到宿主染色体上后，去除抗性基因，再整合片段进去。 但是cre/loxp系统介导的基因删除，是去除两个同向loxp位点间的DNA片段和前一个loxp位点。 如果是这样的话，那么在整合一个片段到染色体上去除掉抗性基因后，就会还剩下一loxp位点。 如果再整合片段上去的话，就会同时存在三个或更多个loxp位点，这样子的话，再用cre重组酶去除抗性基因时，由于有三个或更多个loxp位点，岂不是就不确定它去除的是否是抗性基因，也有可能是其他基因。 不知是我理解错误，还是这其中还有其他什么原因？ 如何通过反复利用cre/loxp系统，提高整合的拷贝数呢？ 希望知道的朋友给我讲解一下，谢谢各位了！ |
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