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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何通过cre/loxp系统去除抗性基因后，提高整合的拷贝数？
汕头大学海洋科学接受调剂
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yanhong2029

金虫 (初入文坛)

[交流] 如何通过cre/loxp系统去除抗性基因后，提高整合的拷贝数？

欲将一外源基因整合到枯草芽孢杆菌染色体上，想实现多拷贝整合。 好像cre/loxp系统可以重复利用，这样就可以在整合了片段到宿主染色体上后，去除抗性基因，再整合片段进去。
    但是cre/loxp系统介导的基因删除，是去除两个同向loxp位点间的DNA片段和前一个loxp位点。 如果是这样的话，那么在整合一个片段到染色体上去除掉抗性基因后，就会还剩下一loxp位点。 如果再整合片段上去的话，就会同时存在三个或更多个loxp位点，这样子的话，再用cre重组酶去除抗性基因时，由于有三个或更多个loxp位点，岂不是就不确定它去除的是否是抗性基因，也有可能是其他基因。
    不知是我理解错误，还是这其中还有其他什么原因？
    如何通过反复利用cre/loxp系统，提高整合的拷贝数呢？  
    希望知道的朋友给我讲解一下，谢谢各位了！
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1楼 2009-10-12 09:18:14
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
yanhong2029(金币+1,VIP+0): 10-13 08:59
yanhong2029(金币+1,VIP+0): 10-13 09:01
cre/loxp系统介导的基因删除不删除前一个loxp位点吧？
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2楼2009-10-12 22:03:35
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
★
yanhong2029(金币+1,VIP+0): 10-13 08:59
建议看看：
Cre/lox System and PCR Based Genome Engineering in Bacillus subtilis. Appl. Environ. Microbiol. 2008
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小木虫之有关部门负责人
3楼2009-10-12 22:52:22
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yanhong2029

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-10-12 22:03:
cre/loxp系统介导的基因删除不删除前一个loxp位点吧？

不删除前一个loxp位点？！  那是怎么删除的呀？  请指教！  谢谢！
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4楼2009-10-13 08:57:12
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liuliangyu027

铜虫 (小有名气)
★
yanhong2029(金币+1,VIP+0): 10-16 19:42
Cre 酶识别两个Loxp位点而切割 相关的介绍中英文都有综述论文
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5楼2009-10-15 22:09:25
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by yanhong2029 at 2009-10-13 08:57:


不删除前一个loxp位点？！  那是怎么删除的呀？  请指教！  谢谢！

只是删除两个loxp位点间的基因而不删除前面的loxp位点。
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6楼2009-10-18 00:06:20
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