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麦小麦Martha

银虫 (小有名气)

[求助] 基因编辑的效率问题

求助,第一次做基因编辑,病毒注射完老鼠八周后,提取组织genomic DNA, 设计了编辑位点前后300bp的引物加上Illumina adapter,扩增genomic DNA (大概30个循环左右)跑DNA胶得到单一的条带,然后回收去做Amplicon-EZ,但是得到的基因编辑效率少的可怜。结果分析的时候就是用正确的基因编辑的数目除以总读数(15万个),求大神指点,不晓得是哪里出了问题。用的跟发表的文章一摸一样的质粒。
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