24小时热门版块排行榜    

查看: 2070  |  回复: 9
【悬赏金币】回答本帖问题,作者andyzhengwp将赠送您 50 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

andyzhengwp

金虫 (小有名气)

[求助] 枯草芽孢杆菌基因敲除 已有1人参与

最近在用pJOE8999对枯草芽孢杆菌基因进行基因敲除,电转诱导表达之后涂平板挑单克隆获得突变体、测序验证也正确,在去除质粒之后跑胶检测发现都变成野生型了,想问问虫友这是为什么?有什么解决方法吗?
回复此楼
每天坚持一点点,终会成功!相信自己
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

andyzhengwp

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by biosci at 2023-10-17 10:52:03
测序的是转进去的未整合的敲除载体

可是我的引物设计的位置为上游引物在左同源臂上游、下游引物在右同源臂下游,扩出来的片段不可能是载体上的啊
每天坚持一点点,终会成功!相信自己
5楼2023-10-19 09:26:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

biosci

捐助贵宾 (知名作家)


2楼2023-10-12 12:29:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

andyzhengwp

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2023-10-12 12:29:13
假阳性

这种状况是怎么发生的呢?为什么测序之类的都正确的呢?
每天坚持一点点,终会成功!相信自己
3楼2023-10-16 10:46:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)


测序的是转进去的未整合的敲除载体

发自小木虫Android客户端
4楼2023-10-17 10:52:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +5 瞬息宇宙 2026-09-01 11/550 2026-09-02 14:15 by simwe390
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
信息提示
请填处理意见