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goldensea7

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】细胞毒性试验中毒物的灭菌问题

我在准备做细胞毒性试验,但一直有个问题存在疑惑,细胞培养过程要求是无菌的,但我的测试毒物是不能用高压或紫外灭菌,所以向大家请教该怎么处理。
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
过滤除菌 不过还要看你用什么溶剂了
2楼2009-10-10 10:37:22
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goldensea7

金虫 (小有名气)

也不能用过滤灭菌,因为是颗粒物
3楼2009-10-10 10:47:08
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doctorsean

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议楼主用钴60照射消毒,很多高校都有这种设备。
4楼2009-10-10 11:27:23
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svidy

金虫 (正式写手)

如果是颗粒物的话,做出来结果可能不准确啊
细胞生长很挑剔的,颗粒药物不是溶液,很可能细胞都活不下去,怎么做实验啊
除非颗粒细小得能过滤膜
5楼2009-10-10 21:40:55
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doctorsean

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
herwan(金币+1,VIP+0):鼓励应助 10-11 11:00
如果是纳米颗粒,不能用滤器灭菌,还是推荐用钴60照射消毒,对颗粒没有影响,灭菌效果确定。
实验的时候可以用颗粒溶液作为空白对照,把颗粒本身的吸光度当作本底减掉。
6楼2009-10-10 22:22:15
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goldensea7

金虫 (小有名气)

谢谢各位的建议,看来还是钴60照射消毒比较合适,特别谢谢doctorsean提醒我用颗粒溶液消除颗粒对吸光度的影响!
7楼2009-10-11 10:09:52
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blackeyedliming


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
颗粒物的细胞毒性做起来相当麻烦,我做过纳米颗粒的细胞毒性,当时由于设备关系,没有用射线消毒,只能过滤除菌,这样浓度上根本没办法保证,只能另作一个毒物的浓度吸收曲线,测出实际浓度,而排除颗粒物的吸光度更是难上加难,因为颗粒物的吸光度可能在1000以上,一般的酶标仪根本到不了这个波长,最后用罗氏的xCELLigence 系统感觉好多了,因为它是根据细胞培养板底部的电极来判断的,推荐一下,不过很贵,但为了一个细胞毒试验不怎么值得。
8楼2009-10-12 11:14:34
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goldensea7

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by blackeyedliming at 2009-10-12 11:14:
颗粒物的细胞毒性做起来相当麻烦,我做过纳米颗粒的细胞毒性,当时由于设备关系,没有用射线消毒,只能过滤除菌,这样浓度上根本没办法保证,只能另作一个毒物的浓度吸收曲线,测出实际浓度,而排除颗粒物的吸光度 ...

唉,不能奢望老板为了一个毒性试验买台那么贵的仪器啊,而且即使买还不知到啥时候,只有在现有的条件基础上尽量想办法做了,谢谢你的建议。我也看了一些做纳米材料毒性的文献,发现很多人都没有写灭菌,这个环节写的非常模糊,也不知道他们是没灭菌,还是不想把自己的方法写出来。
9楼2009-10-13 09:34:22
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xiaoyi0215

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
纳米颗粒灭菌问题的确比较难解决,如果高温灭菌对颗粒性状影响不大的话可以单独对其进行灭菌,然后按体积与培养基混合就行了
10楼2009-10-13 16:15:20
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