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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 【求助】细胞毒性试验中毒物的灭菌问题
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goldensea7

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】细胞毒性试验中毒物的灭菌问题

我在准备做细胞毒性试验，但一直有个问题存在疑惑，细胞培养过程要求是无菌的，但我的测试毒物是不能用高压或紫外灭菌，所以向大家请教该怎么处理。
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1楼 2009-10-10 10:23:23
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
过滤除菌 不过还要看你用什么溶剂了
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2楼2009-10-10 10:37:22
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goldensea7

金虫 (小有名气)
也不能用过滤灭菌，因为是颗粒物
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3楼2009-10-10 10:47:08
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doctorsean

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议楼主用钴60照射消毒，很多高校都有这种设备。
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4楼2009-10-10 11:27:23
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svidy

金虫 (正式写手)
如果是颗粒物的话，做出来结果可能不准确啊
细胞生长很挑剔的，颗粒药物不是溶液，很可能细胞都活不下去，怎么做实验啊
除非颗粒细小得能过滤膜
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5楼2009-10-10 21:40:55
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doctorsean

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
herwan(金币+1,VIP+0):鼓励应助 10-11 11:00
如果是纳米颗粒，不能用滤器灭菌，还是推荐用钴60照射消毒，对颗粒没有影响，灭菌效果确定。
实验的时候可以用颗粒溶液作为空白对照，把颗粒本身的吸光度当作本底减掉。
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6楼2009-10-10 22:22:15
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goldensea7

金虫 (小有名气)
谢谢各位的建议，看来还是钴60照射消毒比较合适，特别谢谢doctorsean提醒我用颗粒溶液消除颗粒对吸光度的影响！
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7楼2009-10-11 10:09:52
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blackeyedliming

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
颗粒物的细胞毒性做起来相当麻烦，我做过纳米颗粒的细胞毒性，当时由于设备关系，没有用射线消毒，只能过滤除菌，这样浓度上根本没办法保证，只能另作一个毒物的浓度吸收曲线，测出实际浓度，而排除颗粒物的吸光度更是难上加难，因为颗粒物的吸光度可能在1000以上，一般的酶标仪根本到不了这个波长，最后用罗氏的xCELLigence 系统感觉好多了，因为它是根据细胞培养板底部的电极来判断的，推荐一下，不过很贵，但为了一个细胞毒试验不怎么值得。
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8楼2009-10-12 11:14:34
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goldensea7

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by blackeyedliming at 2009-10-12 11:14:
颗粒物的细胞毒性做起来相当麻烦，我做过纳米颗粒的细胞毒性，当时由于设备关系，没有用射线消毒，只能过滤除菌，这样浓度上根本没办法保证，只能另作一个毒物的浓度吸收曲线，测出实际浓度，而排除颗粒物的吸光度 ...

唉，不能奢望老板为了一个毒性试验买台那么贵的仪器啊，而且即使买还不知到啥时候，只有在现有的条件基础上尽量想办法做了，谢谢你的建议。我也看了一些做纳米材料毒性的文献，发现很多人都没有写灭菌，这个环节写的非常模糊，也不知道他们是没灭菌，还是不想把自己的方法写出来。
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9楼2009-10-13 09:34:22
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xiaoyi0215

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
纳米颗粒灭菌问题的确比较难解决，如果高温灭菌对颗粒性状影响不大的话可以单独对其进行灭菌，然后按体积与培养基混合就行了
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10楼2009-10-13 16:15:20
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