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临风7071木虫 (正式写手)
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载体酶切验证
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在论坛上看到别人的帖子:我将自己拿到的片段插入PBI121载体中,PCR验证时,我的目的条带有,但是酶切验证的时候,没有条带,为什么? 以下是跟帖的: 原因可能有很多。 1.PCR验证的时候有没有做个阴性对照?如果阴性对照也能拉出目的条带,这说明片段可能没插入。 2.片段可能插入了,但是酶切的有问题。如酶,Buffer等,或者在酶切位点的选择上。 请问原因1,阴性对照也能拉出目的条带,这说明片段可能没插入。是什么意思啊?如果阴性对照也能扩出来,那扩出来的是什么东西呢?请高手指教 |
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yanlili
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