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临风7071木虫 (正式写手)
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[交流]
载体酶切验证
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在论坛上看到别人的帖子：我将自己拿到的片段插入PBI121载体中，PCR验证时，我的目的条带有，但是酶切验证的时候，没有条带，为什么？ 以下是跟帖的： 原因可能有很多。 1.PCR验证的时候有没有做个阴性对照？如果阴性对照也能拉出目的条带，这说明片段可能没插入。 2.片段可能插入了，但是酶切的有问题。如酶，Buffer等，或者在酶切位点的选择上。 请问原因1，阴性对照也能拉出目的条带，这说明片段可能没插入。是什么意思啊？如果阴性对照也能扩出来，那扩出来的是什么东西呢？请高手指教 |
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