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细胞污染常见原因
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无菌观念薄弱，穿戴不注意 1 进细胞房不换鞋，不戴口罩，不戴手套，是细胞房的大忌讳！有更严格的细胞房连帽子都要戴上。为什么呢？换鞋是为了隔离真菌。戴口罩是为了防止口腔支原体不会污染细胞了。不戴手套，根本就清除不掉你手上的细菌真菌，要不你试试看拿火燎一下你的手，焦了才算灭菌。 紫外线和酒精灭菌，不能乱用 2 能灭菌，但是紫外和酒精最多只能灭细菌，对真菌伤害很小。你不戴手套，仅用喷壶喷手是没有什么用的。超净台为什么尽量要用酒精棉球而不是用酒精喷壶呢？因为用酒精棉球的话，可以在灭菌的同时把菌体从手上擦下去。而喷壶只能短暂灭菌而已，所以要多用棉球，少用喷壶。 使用生物安全柜，别超安全线 3 生物安全柜的玻璃窗是有警戒线的，超过这个警戒线，生物安全柜的风帘就起不到太大作用，且会引入室内空气中的真菌，比如你的臭鞋里的酵母啥的。还会让你给细胞送温暖的呼吸里，自动带上支原体。 拿细胞培养瓶的时候不注意操作 4 用细胞培养瓶来培养的时候，最忌讳的是你拿瓶子的时候，手拿着有盖子的那一面。因为一般来说瓶盖开关是最容易接触到瓶口的，你手拿着培养瓶，那手的虎口夹缝里所含有的真菌很容易就接触到瓶盖上，一旦造成污染，就是很严重的。 实验用品乱摆放 5 生物安全柜里操作的时候，门前最忌讳堆一堆杂七杂八的东西，枪头盒、血清、管子，培养皿、移液器、酒精喷壶、酒精灯，堆了一大堆。有的都堵住了安全柜门前的出风口。一来会导致操作起来并不是井井有条，会导致动作幅度过大，扰乱气流。二来这些东西一旦挡住风口，也会扰乱生物安全柜的气流，气流变化会导致外部不洁净的空气流入，也同样会导致生物安全柜的洁净作用失效。 不注意清洁水浴锅 6 水浴锅是比较容易忽视的，复苏细胞的时候，37℃，对细菌真菌来说这就是温床啊。复苏完，湿漉漉的冻存管，任你再怎么喷酒精也并没有什么意义了。那要怎么办，水浴锅一来是定期清洁，二来是加一些抑菌剂。注意：不是让你往里面加双抗！水浴锅里要加2%的硫酸铜，但这个是比较容易腐蚀水浴锅的，所以定期也要更换清洁。 水盘污染 7 培养箱的水盘也是坐拥37℃温床的水环境。水盘里若是飘着特别大的一块块霉斑。一污染就一箱子全报废了，培养箱要定期用0.1%的新洁尔灭或者84清洗（交替使用，防止微生物耐药）。水盘也一样，水盘中加入饱和的磷酸氢二钠可以有效预防细菌真菌，但是需要定期加入去离子水防止析出。 灭菌灭不好 8 细胞房所使用的枪头，必须要经过湿热灭菌， 用报纸包裹好枪头，是因为灭菌锅一般在细胞房外面，所以要保证内部枪头盒结晶。烤干是为了防止内部有水分，当你开启枪头盒后，有水的地方更容易被霉菌的孢子所接触附着，也就更容易污染。所以这个也必须要注意！ 作者：毕合生物 公众号：毕合生物 毕合生物（www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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