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[交流] 细胞污染常见原因

无菌观念薄弱,穿戴不注意

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   进细胞房不换鞋,不戴口罩,不戴手套,是细胞房的大忌讳!有更严格的细胞房连帽子都要戴上。为什么呢?换鞋是为了隔离真菌。戴口罩是为了防止口腔支原体不会污染细胞了。不戴手套,根本就清除不掉你手上的细菌真菌,要不你试试看拿火燎一下你的手,焦了才算灭菌。

  紫外线和酒精灭菌,不能乱用

  2

   能灭菌,但是紫外和酒精最多只能灭细菌,对真菌伤害很小。你不戴手套,仅用喷壶喷手是没有什么用的。超净台为什么尽量要用酒精棉球而不是用酒精喷壶呢?因为用酒精棉球的话,可以在灭菌的同时把菌体从手上擦下去。而喷壶只能短暂灭菌而已,所以要多用棉球,少用喷壶。

  使用生物安全柜,别超安全线

  3

   生物安全柜的玻璃窗是有警戒线的,超过这个警戒线,生物安全柜的风帘就起不到太大作用,且会引入室内空气中的真菌,比如你的臭鞋里的酵母啥的。还会让你给细胞送温暖的呼吸里,自动带上支原体。

  拿细胞培养瓶的时候不注意操作

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   用细胞培养瓶来培养的时候,最忌讳的是你拿瓶子的时候,手拿着有盖子的那一面。因为一般来说瓶盖开关是最容易接触到瓶口的,你手拿着培养瓶,那手的虎口夹缝里所含有的真菌很容易就接触到瓶盖上,一旦造成污染,就是很严重的。

  实验用品乱摆放

  5

   生物安全柜里操作的时候,门前最忌讳堆一堆杂七杂八的东西,枪头盒、血清、管子,培养皿、移液器、酒精喷壶、酒精灯,堆了一大堆。有的都堵住了安全柜门前的出风口。一来会导致操作起来并不是井井有条,会导致动作幅度过大,扰乱气流。二来这些东西一旦挡住风口,也会扰乱生物安全柜的气流,气流变化会导致外部不洁净的空气流入,也同样会导致生物安全柜的洁净作用失效。

  不注意清洁水浴锅

  6

   水浴锅是比较容易忽视的,复苏细胞的时候,37℃,对细菌真菌来说这就是温床啊。复苏完,湿漉漉的冻存管,任你再怎么喷酒精也并没有什么意义了。那要怎么办,水浴锅一来是定期清洁,二来是加一些抑菌剂。注意:不是让你往里面加双抗!水浴锅里要加2%的硫酸铜,但这个是比较容易腐蚀水浴锅的,所以定期也要更换清洁。

  水盘污染

  7

   培养箱的水盘也是坐拥37℃温床的水环境。水盘里若是飘着特别大的一块块霉斑。一污染就一箱子全报废了,培养箱要定期用0.1%的新洁尔灭或者84清洗(交替使用,防止微生物耐药)。水盘也一样,水盘中加入饱和的磷酸氢二钠可以有效预防细菌真菌,但是需要定期加入去离子水防止析出。

  灭菌灭不好

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   细胞房所使用的枪头,必须要经过湿热灭菌, 用报纸包裹好枪头,是因为灭菌锅一般在细胞房外面,所以要保证内部枪头盒结晶。烤干是为了防止内部有水分,当你开启枪头盒后,有水的地方更容易被霉菌的孢子所接触附着,也就更容易污染。所以这个也必须要注意!

作者:毕合生物
公众号:毕合生物
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