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大肠杆菌转化 有菌 一直无阳性？ 已有3人参与
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大肠杆菌转化 有菌 无阳性 之前构过的一个载体，我做了三次，都没构出来 平末端 直接重组的 流程就是扩基因，切载体，重组 ，没用T4连接酶，最后板子上长了菌，但是菌检一个阳性都没有 做了三次了都做不出来，师姐让我下次用T4连接，到底是哪一步出错了啊 发自小木虫Android客户端 |
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4楼2023-08-13 14:04:32
2楼2023-08-07 08:25:57
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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第一，扩基因用的酶扩增出的片段是平末端吗，有的酶扩增结束会在3‘加A;第二，平末端连接也应该使用T4连接酶才能连上吧，沒有磷酸二酯键形成不了质粒，线性片段转进菌裡很快就被降解了 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2023-08-07 15:36:16
shuaibia6
金虫 (小有名气)
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5楼2023-08-14 14:54:51
