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蚝油生菜

新虫 (小有名气)

[交流] 蛋白无法表达,但其中一段截短蛋白可以表达已有5人参与

全长1900bp的片段无法表达,其中后800bp的片段可以大量表达,其他部分都无法表达,这800bp的片段加上前面250bp的片段之后也无法表达了,有老师知道为什么会有这种情况的吗

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蚝油生菜

新虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by qzhyang2008 at 2023-07-30 06:53:34
这个不是很正常的情况吗?
但拜拜做截短就是这个目啊。

是做蛋白互作的,就怕这一段没有互作,所以想表达全长

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3楼2023-07-30 14:12:01
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蚝油生菜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by pennchem at 2023-07-30 18:28:24
是怎么确定更长的片段无法表达? 有没有可能全长表达后被水解掉了,所以看不到全长?

原核表达系统表达真核蛋白的,跑了蛋白胶和WB,请问假如是水解了如何阻止水解呢?

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5楼2023-07-30 23:13:01
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蚝油生菜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yyy0305 at 2023-08-12 17:26:56
有看下蛋白的结构吗?是不是有跨膜的区域,一般含有跨膜的区域蛋白是没法表达从可溶性蛋白的

分析过结构,我只需要表达胞外区域的

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8楼2023-08-13 17:56:15
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