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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 载体构建后提质粒用通用引物无法测序
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蚝油生菜

新虫 (小有名气)

[求助] 载体构建后提质粒用通用引物无法测序 已有1人参与

构建了pgex-4t-1和ppic9k的载体，使用特异性引物进行菌落pcr和提取质粒后的pcr都能得到目的条带，但是无论是菌p还是提质粒以后用通用引物pcr都无法得到任何条带，特异性引物能够测序，通用引物也测不到结果，1个月之前做的都没有问题，最近用的都是同一批切的质粒都是这样，求解
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1楼 2023-07-06 17:12:32
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蚝油生菜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by KM石头 at 2023-07-11 16:00:01
是不是突变了，在通用引物位置前设计引物，扩增一下，测个看一看

后续尝试一下，但是用的质粒是之前成功构建的质粒，测序是正确的，在通用引物位置应该没有突变
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3楼2023-07-12 16:18:08
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KM石头

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

是不是突变了，在通用引物位置前设计引物，扩增一下，测个看一看
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2楼2023-07-11 16:00:01
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wenting8918

木虫 (正式写手)

小硕
猜测 送测序反了

发自小木虫Android客户端
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永远幸福，幸福永远
4楼2024-09-13 08:00:48
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