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蚝油生菜

新虫 (小有名气)

[求助] 载体构建后提质粒用通用引物无法测序已有1人参与

构建了pgex-4t-1和ppic9k的载体,使用特异性引物进行菌落pcr和提取质粒后的pcr都能得到目的条带,但是无论是菌p还是提质粒以后用通用引物pcr都无法得到任何条带,特异性引物能够测序,通用引物也测不到结果,1个月之前做的都没有问题,最近用的都是同一批切的质粒都是这样,求解
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KM石头

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

是不是突变了,在通用引物位置前设计引物,扩增一下,测个看一看
2楼2023-07-11 16:00:01
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蚝油生菜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by KM石头 at 2023-07-11 16:00:01
是不是突变了,在通用引物位置前设计引物,扩增一下,测个看一看

后续尝试一下,但是用的质粒是之前成功构建的质粒,测序是正确的,在通用引物位置应该没有突变
3楼2023-07-12 16:18:08
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wenting8918

木虫 (正式写手)

小硕

永远幸福,幸福永远
4楼2024-09-13 08:00:48
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