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helu_19860

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】硅胶柱层析展开剂的问题

用硅胶柱层析分离黄酮类物质
用的是氯仿:甲醇:乙酸乙酯:水的展开系统,用买来的溶剂配制的话,跑薄层的效果非常好,但是用回收的展开剂就怎么也跑不出来了,气死我了
回收回来的展开剂极性是变小了,小了很多,我就加了甲醇,但是跑薄层就跑不出来点了,就是黄黄的一条带。我就把黄黄的一条带的长度调到和原来能跑出来点的总长度差不多,但是不知道这样行不行,薄层都没点,上柱子能分开嘛!
高手帮帮忙啊,急急急急啊
谢谢啦
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helu_19860

新虫 (初入文坛)

帮帮忙吧
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2楼2009-10-04 21:40:20
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forensic8856

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
薄层用的层析剂要先用现配,不要省这点钱。回收的溶剂肯定是跑不出原来的数值的
3楼2009-10-04 21:58:35
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songe0310

木虫 (著名写手)

傻~傻得没得说的~

★ ★
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chzhbin(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 10-4 22:58
多大的柱子?小柱子的话就不用这么省了。我一般只用单个溶剂系统的回收液,如果你是梯度洗脱的话,回收的溶剂极性很难把握,洗脱剂在柱子中的极性交换不好把握,最起码要在冲一个柱体积以后的洗脱剂才能用吧
你就傻下去吧~~
4楼2009-10-04 22:09:44
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fang209399

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
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chzhbin(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 10-4 22:58
薄层的展开剂最好现用现配,尤其是你用的系统这么多溶剂混合,回收后溶剂的比例肯定是要变的。如果用买来的溶剂能跑出来点,就可以上柱子,因为回收后的展开剂是不准的。上柱子回收的溶剂重复利用时可以用打密度的方法调节极性。
5楼2009-10-04 22:15:09
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roger99

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
chzhbin(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 10-4 22:58
你这个四相系统·回收的溶剂怎么好控制呢
如果梯度就更加了啊
6楼2009-10-04 22:22:40
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笨学生

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
跑薄层最好用干板,与柱层析比较接近!
7楼2009-10-04 22:25:23
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kobechan

至尊木虫 (知名作家)

石鼓

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by fang209399 at 2009-10-4 22:15:
薄层的展开剂最好现用现配,尤其是你用的系统这么多溶剂混合,回收后溶剂的比例肯定是要变的。如果用买来的溶剂能跑出来点,就可以上柱子,因为回收后的展开剂是不准的。上柱子回收的溶剂重复利用时可以用打密度的 ...

这么多相系统,打密度也很难确定其的极性的!
8楼2009-10-04 22:57:33
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enablegirl

银虫 (初入文坛)

就是 啊  还是现配吧
9楼2009-10-05 08:27:14
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helu_19860

新虫 (初入文坛)

jw227(金币+0,VIP+0):如是药典等查的多元体系,大可不必,试一下水饱和的氯仿甲醇 10-5 08:52
我要上的是比较大的柱子
怎么都得一万毫升吧,最好最好是回收再利用,其他实验室也都是这么做的啊
极性不用很准,差不多就行
不是配跑薄层的展开剂,是用薄层来确定柱子的展开剂
高手过来帮帮忙啊
最初不相识,最终不相认
10楼2009-10-05 08:39:51
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